圣羽王鸽MSTN基因多态性及其与生长、肉质性状相关性研究

作     者：原爱平 

作者单位：浙江大学 

学位级别：硕士

导师姓名：尹兆正;卢立志

授予年度：2010年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：圣羽王鸽 生长曲线 MSTN基因 PCR-SSCP 生长性状 

摘      要：测定圣羽王鸽生长、屠宰性状指标及肌肉风味物质含量,将MSTN基因作为生长性状的候选基因进行PCR-SSCP分析,研究圣羽王鸽MSTN单核苷酸多态性与生长性状、肌肉风味物质之间的相关性;在协同分析的基础上,用实时定量PCR技术对MSTN基因在不同组织中的表达差异进行研究。论文主要研究结果如下： 1圣羽王鸽生长曲线拟合及屠宰性状回归分析 采用Logistic、Gompertz生长曲线模型对圣羽王鸽出壳到25日龄的体重变化进行拟合,2种曲线模型的拟合度都很高,均超过0.99,其中Logistic模型的拟合度高达0.99967,Gompertz模型的拟合度也达到了0.99938,圣羽王鸽的生长规律更符合Logistic生长模型。屠宰性状回归分析表明,胸深和体斜长对屠体重性状的决定系数达76.6%,龙骨长对瘦肉重性状的决定系数达53.5%。 2圣羽王鸽肌肉风味物质含量的分析测定 圣羽王鸽肌内脂肪含量为2.15%,饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量相当,分别为35.6%、31.3%与33.1%;脂肪酸组成主要是C18、C16和C20脂肪酸,含量分别为62.36%、24.24%、10.23%,其它脂肪酸含量很少。必需氨基酸(EAA)含量为28.51%,其中赖氨酸、异亮氨酸、亮基酸、苏氨酸、蛋氨酸等含量较高,呈味氨基酸含量高达43.3%。 3圣羽王鸽MSTN基因克隆及序列分析 胸肌RT-PCR扩增得到MSTN基因cDNA,pMD19-T Vector连接转化DH5a大肠杆菌感受态细胞,PCR与双酶切鉴定,测序全长为1128bp。该序列与人小鼠和鸡的同源性依次为86%,92%和98%。相对于鸡MSTN的mRNA序列,圣羽王鸽的MSTN序列存在多个缺失和插入,可能导致其蛋白结构的改变。 4圣羽王鸽MSTN基因多态性及其与生长、肉质性状关联分析 对圣羽王鸽MSTN基因SNPs检测。4对引物中P1和P4两对引物扩增的基因片断中检测到多态性,并均表现为2种基因型。圣羽王鸽群体中MSTN基因P1位点等位基因A频率为0.8375,等位基因B频率为0.1625。P4位点等位基因C频率达到0.9875,而等位基因D频率极低,仅为0.0125. SNP-P1和SNP-P4的多态信息含量分别为0.2352和0.0008,均属低度多态。 MSTN基因与圣羽王鸽体重、体尺、肉质、风味物质的协同分析结果表明：SNP-P1 AA型圣羽王鸽胸宽极显著高于AB型,AB型体斜长、龙骨长都极显著的高于AA型,其他指标无显著差异,表明MSTN基因可以作为圣羽王鸽体尺性状的候选基因。 5圣羽王鸽MSTN基因不同组织表达差异性研究 通过Real-time PCR对MSTN基因组织表达差异和生长协同关系的研究表明：MSTN基因在肝脏表达量最高,其次是脑组织,而在肌肉中的表达量最低。该结果也证明了动物早期肌肉生长速度与MSTN基因表达量负相关的结论;但是MSTN基因在各组织的表达量都未发现与圣羽王鸽早期体重的显著相关(P0.05)。