丹参新品系的评价与花药培养技术的研究

作     者：解玉丽 

作者单位：山东农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王建华

授予年度：2010年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：丹参 品系 评价 花药培养 

摘      要：丹参是临床常用药材,随着需求量的增大,已经开始大面积人工种植。目前丹参市场存在着种质混杂、品质退化等问题。为提高丹参产量和品质,创新丹参种质资源,对6个丹参新品系进行了综合评价,从中筛选出产量及有效成分含量高的品系进行推广种植,并对影响丹参花药培养中愈伤组织形成的主要因素及愈伤组织分化出苗进行了研究,为推动丹参花药培养的应用提供基础。主要试验结果如下: 1丹参新品系的评价 通过对生物学及农艺性状的观察,可以看出6个丹参新品系在叶、茎、花、根部生物学特性上存在显著差异,可以作为区别和鉴定不同品系的依据。6个新品系产量都超过了大田栽培的平均产量水平,有效成分含量都超过了国家药典规定的最低水平。经过综合评价,筛选出高丹参酮含量的18号丹参、高丹酚酸B含量的23号丹参和高产优质的74号丹参。 2丹参新品系生育后期叶片生理活性的变化 生育后期各品系叶片的光合速率、叶绿素含量、可溶性蛋白含量、SOD、POD、CAT等保护性酶活性呈由高到低的变化趋势,MDA含量升高。74号丹参光合速率、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及保护酶活性比其它品系高且下降慢,MDA含量低且增长缓慢。23号在生育后期的前期光合速率、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及保护酶活性高于18号,后期急剧下降,低于18号,MDA含量前期低于18号,后期升高较快,高于18号。3丹参花药培养技术的研究 丹参小孢子发育包括四分体期、单核居中期、单核靠边期、双核期、成熟期五个时期,各时期对应的花蕾外观形态不同。不同基因型的材料,单核靠边期的花蕾、花药形态不同,取材时应根据不同基因型材料的特点进行选择。 对影响丹参花药培养的几个关键因素,如激素配比、基因型、花粉发育时期、温度和甘露醇预处理、培养方式、碳源及不同激素对愈伤组织分化出苗等因素进行了研究,结果表明:以18号或147号丹参为材料,将小孢子发育处于单核靠边期的花蕾进行4℃低温预处理2d或将花药进行甘露醇10g·L预处理4d,接种在含6-BA 2 mg·L ,NAA 0.2 mg·L,蔗糖3%的MS固液双层培养基上,最有利于愈伤组织的生长;将愈伤组织转接在含1.0mg·L6-BA、0.1mg·LNAA的分化培养基上,能获得最高的出苗率。