大鼠重症胰腺炎急性肺损伤TLR4/NF-κB信号传导通路及大黄附子汤治疗作用的实验研究

作     者：刘伟光 

作者单位：大连医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：路小光

授予年度：2008年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：重症胰腺炎 急性肺损伤 Toll-样受体4 核转录因子-κB 大黄附子汤 

摘      要：目的:探讨Toll-样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号传导通路在大鼠重症胰腺炎急性肺损伤(SP-ALI)发病中的作用机制及中药大黄附子汤对SP-ALI的治疗作用。 方法:SD大鼠随机分为假手术组(Ⅰ组)、SP-ALI(Ⅱ组)、大黄附子汤组(Ⅲ组)和血必净组(Ⅳ组),每组32只。各组再按3、6、12、24h时间点分为四个亚组,每个亚组各8只。Ⅰ组开腹后翻动胰腺数次,行空肠造瘘;Ⅱ组采用胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠(1ml/kg)诱导SP-ALI模型,行空肠造瘘;Ⅲ组、Ⅳ组在Ⅱ组的基础上于术后30min经空肠造瘘管分别注入大黄附子汤及血必净各2ml。各组按时间点处死大鼠,心脏取血测定内毒素(LPS)、淀粉酶含量,取胰腺及肺脏观察其病理形态学变化;应用免疫组化(Immunohistochemistry)定位检测肺组织TLR4、NF-κB p65的表达,免疫印迹(Western Blot)检测肺TLR4、NF-κB p65含量变化。 结果:⑴Ⅱ组术后3～24h淀粉酶、内毒素及胰腺和肺损伤病理组织学评分较Ⅰ组均明显升高(P 0.05 )。术后3h出现胰腺充血,肺轻度水肿;6h胰腺明显水肿,肉眼见肺水肿;12h和24h胰腺局部出现紫红色坏死灶,少量血性腹水和胰周脂肪皂化、出血,肺水肿加剧,暗红色肺表面可见散在小出血点。证明成功建立了大鼠SP-ALI模型。⑵免疫组化及免疫印迹结果显示肺组织TLR4、NF-κB p65各时间点表达显著增加(P0.05),TLR4与NF-κB表达呈显著正相关(r=0.992,P 0.01)。⑶Ⅲ组内毒素、淀粉酶及胰腺和肺损伤病理组织学评分在术后各时间点较Ⅱ组均显著降低(P 0.05);Ⅲ组各时间点肺组织TLR4、NF-κB p65的表达结果较Ⅱ组均显著降低(P 0.05);Ⅲ组各时间点上述指标结果较Ⅳ组均显著降低(P 0.05)。 结论:⑴胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠成功建立大鼠SP-ALI模型。⑵TLR4/NF-κB信号传导通路在SP-ALI发生发展过程中起重要作用。⑶大黄附子汤通过降低血清LPS水平,抑制肺组织TLR4、NF-κB p65活化,下调TNF-α、IL-1β的表达,从而减轻SP-ALI的程度。