池蝶蚌精子活力及秋冬季节育儿囊胚胎生成的研究

作     者：罗颖 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：洪一江

授予年度：2013年

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

主      题：池蝶蚌 育儿囊 精子形态 精子存活 冰冻切片 自体受精 

摘      要：池蝶蚌是我国近些年来开发出来的一种优质淡水育珠蚌,已被广泛地应用于淡水珍珠的大规模培育。目前,已有池蝶蚌遗传育种、抗病等方面的研究,然而,对其繁殖生物学的研究较为少见,本研究以池蝶蚌为研究对象,开展了其精子的形态、活力及存活率的相关研究,并探究了池蝶蚌冬季繁殖状况以及池蝶蚌自体受精情况,为可持续性利用好这一育珠蚌资源奠定理论基础,研究结果如下： 1、通过染色的方法,观察了池蝶蚌精子在不同的溶液中的存活时间及运动方式。吸取性腺内的液体于离心管中,而后加入到蚌生理盐水、蒸馏水和池塘水三种溶液中,每间隔30分钟取少量液体应用等体积0.1%曙红Y进行染色15分钟后镜检,统计不同溶液中死亡精子和活精子在不同时间段的存活比率。结果表明：池蝶蚌精子在生理盐水中存活时间最长,其次是蒸馏水,存活时间最短的为池塘水。光镜下观察池蝶蚌精子形态,其展现为子弹形头部及细长均匀鞭毛尾巴,属鞭毛型。精子全长约(254.91±20.03)μm;头部呈子弹形,长为(32.33±2.15)μm,宽为(16.60±3.29)μm;鞭毛细长均匀,长为(216.67±19.73)μm,且池蝶蚌精子主要表现为快速直线游动、弧形游动和左右摆动三种运动方式。 2、将性成熟的雌雄池蝶蚌混养,吊于独立的池塘中,定期取材,采用冰冻连续切片方法,观察育儿囊的发育及胚胎生成情况,结果显示：池蝶蚌育儿囊在11月到3月基本不发育,形状小而圆,且外腮干瘪,颜色较深。4月时的雌蚌外腮开始发育,育儿囊逐渐变为长条形,空腔逐渐变大,外观上表现为饱满有光泽,颜色较浅,黄色中有白块。镜检下其育儿囊内有胚胎。表明池蝶蚌在11月到3月繁殖不活跃或无繁殖,繁殖期从4月开始。 3、为探究池蝶蚌中是否有自体受精现象,将性成熟的雄蚌和雌蚌分别单独吊养于不同的池塘中,每间隔一个月取材检测其外腮育儿囊中胚胎的有无,采用冰冻连续外腮切片,结果显示,从11月到次年3月,雌雄池蝶蚌育儿囊不发育,呈小圆形,育儿囊内不见有胚胎。4月时的育儿囊开始发育,呈大而连续的空腔,但其中均不见有胚胎。暗示池蝶蚌中无自体受精现象,且育儿囊的发育似乎也并不需要胚胎的刺激。