不同氧浓度对体外培养大鼠胎肺发育的影响

作     者：王彦蕊 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：岳少杰

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主      题：胎肺发育 分支形成 氧 

摘      要：背景氧对胎肺发育至关重要,早产儿生后长时间氧疗可导致慢性支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia, BPD）发生;宫内缺氧也可引起胎肺发育受限,体外研究发现正常胚胎发育所需要的氧浓度为3%～5%,那么高于5%O2、低于3%O2是否会抑制胎肺分支发育及分子机制还有待研究。 目的在离体胎肺器官培养模型中,观察氧浓度对胎肺分支发育和细胞增殖的影响,进一步观察胎肺发育相关基因mRNA的变化,初步探讨氧浓度影响肺发育是否与这些基因有关。 方法1.胎肺器官培养及分组剖孕13天SD大鼠取胎肺,分别在3%O2、1%O2、19%O2条件下培养48小时,观察胎肺的终末分支数、生长面积,免疫荧光EdU染色观察胎肺细胞的增殖情况。2. Real-timePCR检测]HIF-1α、HIF-2α、VEGF、TN-C等胎肺发育相关基因的mRNA的表达。 结果1.1%O2和19%O2组胎肺终末分支数、生长面积和EdU荧光强度均低于3%O2（P0.05）。2.与3%O2组比较,1%O2和19%O2组胎肺VEGF、TN-C mRNA的表达量下降（P0.05）, HIF-1α、HIF-2α mRNA的表达量无变化（P0.05） 结论： 1.成功建立了孕13天大鼠胎肺器官培养模型。 2.首次动态观察了3%02、1%02、19%02条件下对体外器官培养的大鼠胎肺分支发育的影响,发现氧浓度过低（1%02）和过高（19%02）都会抑制胎肺的发育。 3.本研究首次发现氧浓度过低（1%02）和过高（19%02）都会抑制胎肺VEGF和TN-C基因表达,提示低氧（1%02）和高氧（19%02）抑制胎肺发育可能与VEGF、TN-C表达下降有关。