化学修饰甲壳素/壳聚糖对P-选择素介导的炎性细胞粘附的作用的研究

作     者：黄金丰 

作者单位：东北师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：曾宪录

授予年度：2007年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：细胞粘附 选择素 甲壳素/壳聚糖 

摘      要：选择素介导的白细胞在血管内皮上的滚动是维持细胞免疫应答的关键机制。作为临床广泛应用的抗凝血药物肝素是P-选择素的一种配体并可以干扰P-选择素与其天然配体的结合,所以肝素抗炎活性的一个重要方面就是抑制了由P-选择素介导的细胞粘附。甲壳素/壳聚糖是丰富的天然高分子氨基多糖化合物,具有良好的生物官能性、生物相容性、血液相容性和生物降解性,无毒性,吸附性等,是极有价值的天然生物材料。甲壳素/壳聚糖硫酸化等化学修饰将可以得到肝素类似物,具有抗凝血、抑制肿瘤转移和血管生成、抗病毒及抗微生物等多种活性。 本研究通过多种选择性化学修饰方法制备了6种甲壳素/壳聚糖衍生物,分别为N-S-Chitosan、6-S-Chitosan、N,6-S-Chitosan、N,3,6-S-Chitosan、6-CM-Chitin、3,6-S-CM-Chitin,采用红外光谱分析技术、13C核磁共振技术对各种衍生物进行了初步的结构分析。选取HL60细胞系(细胞表面高表达P-selectin配体PSGL-1的人源早幼粒白血病细胞系)与稳定转染P-选择素的CHO细胞系在静止和流动状态下的相互作用的实验体系来检测肝素和甲壳素/壳聚糖的肝素类似物对这种作用的抑制。 研究结果表明,6种衍生物都符合预期得到的结构要求。抑制活性检测结果表明,N,6-S-Chitosan、N,3,6-S-Chitosan、3,6-S-CM-Chitin在静止和流动状态下对P-选择素介导的细胞粘附均具有良好的抑制作用,并且这种抑制作用在同一质量浓度下强于肝素;而N-S-Chitosan,6-S-Chitosan,6-CM-Chitin没有抑制作用或抑制作用不明显。 本文首次以天然氨基多糖-Chitin/Chitosan为材料,用于P-选择素介导的细胞粘附的抑制研究。为以P-选择素为靶点的抗炎临床药物的开发提供了很有价值的实验基础。