白介素21治疗DOCK8敲除小鼠哮喘模型的疗效观察及机制探讨

作     者：吴嘉彬 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：代继宏

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主      题：DOCK8敲除小鼠 过敏性哮喘 卵清蛋白 免疫球蛋白E 白介素-21 

摘      要：目的:应用低剂量卵清蛋白致敏诱导DOCK8敲除小鼠发生哮喘,并应用重组小鼠白介素-21进行滴鼻治疗,检测小鼠呼气阻力、气道炎症情况、血清IgE、外周血和脾脏中IgE+B细胞百分比,初步探讨DOCK8敲除小鼠血清高水平Ig E与IL-21的关系,以了解IL-21在DOCK8缺陷病人易感过敏性哮喘的作用。方法:将6到8周DOCK8敲除小鼠和同窝野生型小鼠随机分为KO-OVA-IL-21、WT-OVA-IL-21、KO-OVA、WT-OVA、KO-con和WT-con6组,KO-OVA组和WT-OVA组在第0天给予25μg/ml OVA/氢氧化铝佐剂致敏液200μl腹腔注射致敏,在第14、21天腹腔注射水合氯醛溶液麻醉后给予1.5%OVA 50μl经气管滴入进行激发,KO-con组和WT-con组的致敏激发均用PBS代替,KO-OVA-IL-21组和WT-OVA-IL-21组于第15到17天给予20ng/天重组IL-21滴鼻治疗,于第24、39天处理小鼠,检测各组小鼠呼气阻力;支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例;血清IgE水平;病理切片HE染色及病理评分;检测小鼠外周血和脾脏淋巴细胞中Ig E+B细胞比例。结果:经低剂量OVA诱导的DOCK8敲除小鼠BALF中炎症细胞总数(6.219±0.276*10^9/ml,n=8,P0.001)明显升高;气道阻力、血清总IgE及OVA特异性IgE水平、肺部炎症浸润及病理评分、嗜酸性粒细胞数有所增高;WT-OVA与WT-con比,气道炎症反应有所升高,但气道阻力无明显增加;KO-OVA组小鼠Ig E+B细胞高于其他3组;应用重组IL-21滴鼻治疗后,气道高反应性呈延迟恢复,其他各指标有所降低。结论:低剂量卵清蛋白可致敏诱导DOCK8敲除小鼠发生过敏性哮喘,与其自发性高水平IgE所致过敏体质有关。利用重组小鼠IL-21可缓解DOCK8敲除小鼠哮喘,可减低呼气阻力、气道炎症浸润、IgE水平及IgE+B细胞比例,证明了DOCK8敲除小鼠自发性高水平IgE与其分泌的IL-21减少有关,其机制可能是IL-21诱导IgE+B细胞凋亡。