加味启膈散抑制食管癌转移的动物实验研究

作     者：薛健雄 

作者单位：河北医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李晶

授予年度：2018年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：加味启膈散 食管癌细胞KYSE150 前胃癌MFC细胞 裸鼠 615小鼠 肺转移 

摘      要：目的:通过观测裸鼠食管癌肺转移结节数,615小鼠瘤体和肺转移抑制情况,以及两种小鼠肿瘤组织中E-cadherin、角蛋白8、snail、Cx43及WNT2蛋白表达,探讨加味启膈散抑制食管癌肺转移的机制。方法:1尾静脉注射食管癌细胞KYSE150建立裸鼠肺转移模型,随机分成生理盐水组、卡培他滨组和加味启膈散组,从第二日起加药干预,隔日称量裸鼠体重,应用动物活体成像系统观测裸鼠肺转移情况。右肩胛皮下接种前胃癌细胞MFC建立615小鼠前胃癌移植瘤模型,随机分成生理盐水组、卡培他滨组和加味启膈散组,第三日起加药干预。每3日测量皮下瘤长短径,处死后剥离瘤体和肺组织。2计数各组裸鼠和615小鼠肺转移结节,用HE染色检测其镜下表现。3绘制各组裸鼠体重变化曲线。4 Western blot检测裸鼠肿瘤组织和615小鼠移植瘤中E-cadherin、角蛋白8、snail、Cx43及WNT2蛋白表达。结果:1.第12周通过动物活体成像系统检测到裸鼠肺部有生物学发光,提示出现肺转移。加味启膈散组和卡培他滨组光子强度低于生理盐水组。2.计数各组裸鼠肺转移结节,加味启膈散组和卡培他滨组肺结节数均少于生理盐水组,差异有统计学意义(P0.05)。5.观察肺结节HE病理染色切片,为低分化鳞状细胞癌,细胞异型性明显,形态多样,胞核较大,染色较深呈粗颗粒状。*** blot结果显示加味启膈散组及卡培他滨组与生理盐水组相比E-cadherin、角蛋白8、及Cx43表达上升(P0.05),snail及WNT2蛋白表达下降(P0.05)。结论:1.加味启膈散能够抑制裸鼠食管癌肺转移。2.加味启膈散能够抑制荷瘤615小鼠肿瘤生长和肺转移。3.加味启膈散能够增强食管癌细胞E-cadherin、角蛋白8及Cx43的表达,降低snail和WNT2蛋白的表达。