载白蛋白纳米粒的温敏原位凝胶给药系统的研究

作     者：娄杰 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张良珂

授予年度：2014年

学科分类：100702[医学-药剂学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：小檗碱 白蛋白纳米粒 温敏原位凝胶 眼部给药 泊 姜黄素 白蛋白纳米粒 温敏原位凝胶 眼部给药 

摘      要：白蛋白纳米粒（BSA-NPs）是以白蛋白为基质，采用多种方法制备得到的纳米级微粒。由于白蛋白纳米粒给药系统具有良好的靶向性、缓控释效果以及生物相容性好等优点，因此在药物传递系统中占据着重要的地位。温度敏感型原位凝胶在室温下为液体制剂，能对外界环境温度的变化产生响应，进而表现出由溶液相向凝胶相的相转变。本实验将原位凝胶给药系统与白蛋白纳米粒给药系统相结合，使制剂在眼部给药后发生胶凝、黏度增大，延长了载药白蛋白纳米粒在眼部的滞留时间，能更好的提高药物在眼部的吸收和生物利用度。 本课题的内容主要分为两部分，制备和研究了载有不同药物的白蛋白纳米粒原位凝胶给药系统，并对两者的性质进行初步考察。 第一部分小檗碱白蛋白纳米粒原位凝胶给药系统的制备和性质研究 本实验采用泊洛沙姆407（F127）和泊洛沙姆188（F68）为温敏凝胶基质，以凝胶的胶凝温度为考察指标对处方进行优化，得到优化后的凝胶基质处方为26%（w/w） F127和4%（w/w）F68，该优化处方在30.9℃以下时为流动性较好的液体，经人工模拟泪液（STF）按比例稀释后在34.2℃以上会发生相转变形成黏度较大的凝胶。以牛血清白蛋白（BSA）为纳米粒基质，0.25%戊二醛为交联剂，采用去溶剂化法制备了小檗碱白蛋白纳米粒（Ber-BSA-NPs），然后以冷溶法制备了小檗碱白蛋白纳米粒原位凝胶（Ber-BSA-NPs-Gel）。制得的凝胶在STF稀释前胶凝温度为（30.4±0.1）℃，STF稀释后胶凝温度为（34.4±0.1）℃。用NDJ-1型黏度计测定凝胶的黏度，分别测得到在室温下STF稀释前的凝胶黏度为（0.2630±0.0283）Pa·s，STF稀释后的凝胶黏度为（0.2432±0.0215）Pa·s;加热在34.5℃以上后，STF稀释前的凝胶黏度为（0.5100±0.0184）Pa·s，STF稀释后的凝胶黏度为（0.4900±0.0215）Pa·s。以小檗碱原位凝胶（Ber-Gel）和小檗碱溶液（Ber-Sol）为参比，采用透析袋扩散法考察了Ber-BSA-NPs-Gel的体外释药行为。实验结果表明Ber-BSA-NPs-Gel具有较好的缓释作用，制备得到的眼用温敏凝胶符合眼部应用要求，具有良好的应用前景。 第二部分姜黄素白蛋白纳米粒原位凝胶给药系统的制备和性质研究 本实验制备和评价了载有姜黄素白蛋白纳米粒的温敏原位凝胶（Cur-BSA-NPs-Gel）给药系统。采用去溶剂法制备姜黄素白蛋白纳米粒（Cur-BSA-NPs），以F127和F68为凝胶基质，冷溶法制备Cur-BSA-NPs-Gel。采用星点设计-效应面法考察F127和F68浓度对凝胶胶凝温度的影响，并以胶凝温度为指标，优化凝胶基质处方。优化后的凝胶处方为26%（w/w）F127和4%(w/w) F68，该处方在30.7℃以下为自由流动的液体制剂，用STF按比例稀释后，在34.4℃以上会转变成半固态的凝胶。用NDJ-1型黏度计分别测定了用STF稀释前以及稀释后的凝胶黏度。分别采用透析袋扩散法和无膜溶蚀法考察凝胶的体外释放行为和溶蚀行为。考察结果表明Cur-BSA-NPs-Gel有很好的缓释效果，并且在凝胶中加入白蛋白纳米粒并不影响凝胶的结构。制剂的体内评价试验采用的试验动物为新西兰大白兔。眼部刺激性评价采用Draize试验，试验结果表明Cur-BSA-NPs-Gel对眼部无刺激，Cur-BSA-NPs-Gel作为眼部给药系统安全无毒。制剂体内生物利用度通过眼部给药测定房水中药物浓度来评价，该试验以姜黄素混悬液（Cur-Sus）为参比。试验结果表明Cur-BSA-NPs-Gel能够显著提高姜黄素在房水中的浓度，进而提高药物的生物利用度。因此本制剂作为眼部给药系统用于DR的治疗具有较好的临床应用前景。