TRP通道在人脑微血管内皮细胞机械牵张中的作用及其信号转导机制研究

作     者：孙彦龙 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：杨刚

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：机械牵张刺激 瞬时感受器电位通道 钙离子内流 

摘      要：目的：观察瞬时感受器电位（TRP）通道在人脑微血管内皮细胞(HBMEC)机械牵张刺激中的作用，并对其信号传导入胞内的机制进行初步探讨。 方法：HBMEC体外培养，采用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激，根据不同施加条件将细胞分为对照组、单纯牵张组、牵张+SKF-96365(非选择性TRP通道阻滞剂)组、牵张+低分子量肝素(LMWH)组、牵张+一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）组共五组。采用激光扫描共聚焦显微镜观察胞内游离Ca2+荧光分布情况，流式细胞仪检测牵张前后胞内Ca2+相对荧光强度变化;Western blot检测牵张前后一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达情况。 结果：流式细胞仪检测结果显示，与对照组（73.15±8.20）和牵张+SKF-96365组（79.12±8.98）胞内Ca2+浓度相比较，单纯牵张组（103.86±7.05）胞内Ca2+浓度明显升高（P0.05）;Western blot检测结果显示，与对照组（35.62±4.38%）、牵张+SKF-96365组（36.38±4.21%）和牵张+L-NAME组（34.25±4.83%）相比较，单纯牵张组一氧化氮合酶（43.13±3.20%）（eNOS）蛋白表达水平明显升高（P0.05）。 结论：机械牵张刺激能提高HBMEC胞内游离Ca2+浓度和eNOS蛋白表达量，其机制可能与TRP通道的激活、胞外Ca2+内流相关。