慢性间歇低氧对小鼠海马CA1区神经元自噬的影响

作     者：刘辉玉 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈锐

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100213[医学-耳鼻咽喉科学] 10[医学] 

主      题：慢性间歇低氧 海马 自噬 自噬小体 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 

摘      要：目的观察慢性间歇低氧(CIH)对小鼠海马CA1区自噬的影响,探讨间歇低氧对海马CA1区神经元损伤的可能机制。 方法我们前期研究用间歇低氧舱与气体控制系统建立了睡眠呼吸暂停模式的慢性间歇低氧小鼠模型,在此基础上,选取ICR雄性幼鼠60只,随机分为常氧对照组(unhandled control group,UC) 30只和慢性间歇低氧组(chronic intermittent hypoxia group,CIH) 30只,CIH组根据低氧造模时间再分为间歇低氧3天(A组)、1周(B组)、2周(C组)、3周(D组)和4周(E组)组,采用透射电镜观察各组小鼠海马CA1区神经元自噬泡等超微结构的变化;并用Western-blot检测各组小鼠海马CA1区微管相关蛋白轻链3(LC3)-LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达情况。各CIH组间及各UC组间比较用单因素方差分析,CIH组与其相应UC组比较用t检验。 结果(1)间歇低氧后小鼠海马自噬泡等超微结构改变:透射电镜观察显示,间歇低氧小鼠自第3天起发现神经元胞浆内可见线粒体嵴断裂、肿胀变形、空泡化,并可见完整包裹双层膜结构的自噬小体,内包裹较多物质,溶酶体被激活、数目增加,同时可见高尔基体包含完整双层膜结构的自噬小体。(2)各组小鼠海马CA1区神经元LC3蛋白表达:Western blot结果显示,UC组小鼠海马CA1区神经元LC3-II/LC3-I蛋白表达水平较低,且UC各组小鼠之间比较无统计学意义。CIH各组小鼠自间歇低氧3d起,海马CA1区神经元LC3-II/LC3-I蛋白表达水平即有所升高,与其各自对照组比较有统计学意义(P0.05或P0.01);随着间歇低氧时间的延长,CIH组小鼠海马CA1区神经元LC3-II/LC3-I蛋白表达呈逐渐增加趋势,且CIH组各组间比较,差异均有统计学意义(p0.05或p0.01)。其中3w和4w组升至较高水平,分别升高60%和84%左右(P0.01),3d、1w和2w组LC3-II/LC3-I蛋白表达较其各自对照组稍有升高迹象(P0.05)。 结论慢性间歇低氧可诱导小鼠海马CA1区神经元自噬的激活,这可能是慢性间歇低氧引起神经功能损伤的可能机制之一。