抗氧化剂-硫辛酸对实验性ALI/ARDS大鼠的保护作用的研究

作     者：顾红军 

作者单位：第二军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李强

授予年度：2004年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合症 α-硫辛酸 TNF-α 内毒素 

摘      要：急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome ALI/ARDS)是一种以肺实质弥漫性炎症为特征的疾病。随着现代呼吸支持技术的进展,ALI/ARDS患者的死亡率仍在40%以上,因此寻求新的抑制肺部炎症损伤的药物,一直成为人们关注的焦点。氧化介导的组织损伤是ALI/ARDS的重要发病机制。使用乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine ,NAC)、L-2-oxothiazolidine-4-carboxylate (OTZ, 半胱氨酸前体物质)和维生素E等抗氧化剂,在动物模型及临床试验中均显示出可以改善ALI/ARDS的部分病理生理指标,如心脏指数和PaO2,提示抗氧化剂对ALI/ARDS有一定的保护作用。ɑ-硫辛酸(ɑ-lipoic acid,LA)是一种代谢性抗氧化剂,因此推测LA对ALI/ARDS可能存在一定的保护作用。目前尚未发现LA在ALI/ARDS中应用的相关报道。本课题拟通过LA干预ALI/ARDS动物模型,观察其有无对ALI/ARDS保护作用。 目 的 本实验的目的是通过观察代谢性抗氧化剂LA干预内毒素(lipopolysaccharide LPS)诱发的SD大鼠ALI/ARDS模型,观察病理生理的变化,探讨LA在ALI/ARDS治疗中的应用前景。 方 法 一、LPS诱发SD大鼠ALI/ARDS模型复制 采用内毒素(Escherichia coli 0111:B4)6mg/kg尾静脉注射诱发SD大鼠造成ALI/ARDS模型。 二、硫辛酸干预LPS诱发SD大鼠ALI/ARDS模型的病理生理参数影响 LPS诱发SD大鼠建立ALI/ARDS模型,于LPS注射后30min以不同剂量LA(10mg/kg、30mg/kg、100mg/kg)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)分别自尾静脉注射,于LPS注射后1h、2h、4h和6h分别测定大鼠PaO2、血清脂过氧化物水平、BALF中细胞计数和蛋白浓度,肺W/D比,血清和BALF中 TNF-α,死亡大鼠生存时间,以及肺组织的病理表现及超微结构变化,评价LA对内毒素诱发 SD大鼠ALI/ARDS模型的保护作用。 结 果 ***诱发SD大鼠ALI/ARDS模型复制结果。予以大鼠LPS6mg/kg尾静脉注射后与生理盐水组相比,PaO2进行性下降,PaO2从1h(75.69±11.01 mmHg)到6h(57.97±15.74 mmHg)均明显下降,统计学有显著差异(P0.01)。脂过氧化物进行性增高,从1h(218.6±24.31 ***)到6h(367.4±46.41 ***)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。肺湿干比进行性增高,从1h(4.48±0.09)到6h(4.82±0.09)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。BALF中蛋白浓度进行性增高,从1h(0.324±0.05mg/ml)到6h(0.835±0.1mg/ml)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。细胞计数进行性增高,1h(4.4±0.77×107/L)到6h(9.35±1.48×107/L)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。血清TNF-α浓度从1h(1.018±0.38 ng/ml)到6h(0.096±0.021ng/ml)均明显增高,峰值在1h,统计学有差异(P0.05)。BALF中TNF-α浓度从1h(0.259±0.04 ng/ml)到6h(0.429±0.05ng/ml)均增高,峰值在6h,1h和6h统计学有显著差异(P0.01)。光镜下表现:肺泡结构破坏,较多肺泡萎陷,肺出血,肺泡内见大量红细胞,肺间质水肿,肺泡隔增宽,肺泡间质见大量炎症细胞和蛋白样物渗出。 2.硫辛酸干预LPS诱发SD大鼠ALI/ARDS模型的病理生理参数动态变化。予以LA(100mg/kg)干预组与LPS组相比,PaO2从1h(92.96±9.56mmHg)到6h(87.38±3.93mmHg)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。脂过氧化物从1h(126.6±28.74 ***)到6h(187.2±24.35 ***)均明显减低,统计学有显著差异(P0.01)。肺W/D比从1h(4.34±0.05)到6h(4.49±0.08)均明显增高,统计学有显著差异(P0.01)。BALF中蛋白浓度从1h(0.310±0.09 mg/l)到6h(0.390±0.05 mg/l)减少,4h和6h有统计学有显著差异(P0.01)。BALF细胞计数1h(3.63±0.80×107/L)到6h(4.65±0.90×107/L)均明显增高,4h和6h有