大鼠脑缺血再灌注后炎症介质FKN、MCP-1、TNF-α表达变化的研究

作     者：周美君 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：范学军

授予年度：2012年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：缺血再灌注 炎症反应 FKN MCP-1 TNF-α 

摘      要：目的观察趋化因子MCP-1、FKN及细胞因子TNF-α在大鼠缺血再灌注后缺血区脑组织中的表达,探讨三者在再灌注炎症中的变化规律及意义。 方法102只体重约250-300g健康成年雄性SD大鼠,随机分为9组：正常组（n=6）、假手术组（n=12）、缺血2h再灌注3h组即I2h／R3h（n=12）、I2h／R6h组（n=12）、I2h／R12h组（n＝12）、I2h／R24h组（n=12）、I2h／R48h组（n=12）、I2h／R72h组（n=12）、I2h／R7d组（n=12）。采用Longa线拴法[1]制备大脑中动脉栓塞模型（MCAO）,术后评估大鼠神经功能情况。正常组、假手术组、I／R各亚组每组各6只大鼠,采用尼氏体染色观察脑组织病理学变化;免疫组织化学法检测各组FKN、MCP-1、TNF-α在缺血区脑组织免疫阳性细胞的表达变化。假手术组、I／R各亚组各6只大鼠,应用Western blot方法检测缺血再灌注后各时间点FKN蛋白的表达水平。 结果 1.尼氏体染色示：正常组及假手术组大鼠缺血区脑组织内尼氏体大,数量多;与正常组及假手术组相比,再灌注后3h组、6h组尼氏体含量逐渐减少（P0.05）,12h组、24h组、48h组、72h组、7d组尼氏体含量进一步减少（P0.05）。 2.免疫组化结果示：TNF-α在正常组及假手术组少量表达,两组间差异无统计学意义（P0.05）;TNF-α在再灌注后早期（3h组）即出现表达上调（P0.05）,24h组表达达高峰（P0.05）,随后逐渐下降,7d组TNF-α阳性细胞表达数回归基线水平（P0.05）。趋化因子FKN在正常组和假手术组均有一定数量的表达,两组间差异无统计学意义（P0.05）;再灌注后3h组表达上调（P0.05）,24h组达高峰（P0.05）,然后逐渐下降,7d组阳性细胞表达数差异与正常组及假手术组相比无统计学意义（P0.05）。趋化因子MCP-1在正常组及假手术组极少量表达,再灌注后其表达上调稍延迟,于6h组出现升高（P0.05）,48h组达高峰（P0.05）,然后逐渐下降,7d组表达仍较高（P0.05）。 *** Blot检测示：FKN在假手术组有一定水平的表达,再灌注后3h组表达即有上调（P0.05）,24h组表达水平最高（P0.05）,48h组仍有较高的表达水平（P0.05）,7d组回归基线水平。 结论 1.大鼠脑缺血再灌注后损伤区早期即出现TNF-α表达上调,提示TNF-α可能促发缺血再灌注后炎症反应。 2.趋化因子FKN及MCP-1在缺血再灌注后脑组织中表达上调,并出现动态变化趋势,提示二者参与了脑缺血再灌注损伤后炎症反应过程。 ***-1表达上调及高峰落后于TNF-α、FKN,提示MCP-1表达增多,可能与单核细胞吞噬坏死组织、促进神经修复有关。