高压氧调控急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的实验研究

作     者：任一鹏 

作者单位：华北理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张国志

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：急性重症胰腺炎 高压氧 Bax/Bcl-2 脾细胞 凋亡 

摘      要：目的探讨高压氧治疗对急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的影响,研究其发生机制,并为合理开展相关临床治疗提供理论依据。方法首先选取45只SD雄性大鼠,随机分为3组,即正常对照组(5只)、假手术(sham)组(20只)、急性重症胰腺炎(SAP)组(20只),其中sham组只进行单纯的开关腹术,SAP组均采用逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠的方法制备胰腺炎模型,sham组和SAP组各分为4个亚组,每组5只,分别在术后3h、6h、12h和24h处死。检测正常对照组和各模型组大鼠血淀粉酶,并用Western blot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量,Bax在急性重症胰腺炎各亚组中表达以6h组最高,之后降低;Bcl-2表达呈递减趋势,故选取SAP-6h组为HBO干预组;再选取30只SD雄性大鼠,随机分为急性重症胰腺炎高压氧治疗(SAP-HBO)组(15只)和急性重症胰腺炎6h(SAP-6h)组(15只),其中SAP-HBO组于造模成功后1h内给予高压氧治疗(压力为2ATA,氧浓度98%,治疗时间为1h),分别于造模后6h处死SAP-HBO组和SAP-6h组。计算各组大鼠腹水量;HE染色观察胰腺组织病理变化;Western blot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测脾脏细胞的凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果1.SAP-HBO组Bax表达明显低于SAP-6h组;SAP-HBO组Bcl-2表达明显高于SAP-6h组;2.SAP-HBO组凋亡指数(30.072±1.143)明显低于SAP-6h组(58.440±1.263);3.SAP-6h组胰腺组织标本可见明显出血坏死,大量炎细胞浸润,而SAP-HBO组胰腺组织标本出血坏死及炎细胞浸润情况轻于SAP-6h组;4.SAP-HBO组腹水量(6.200±0.960ml)明显低于SAP-6h组(11.033±1.187 ml)。结论SAP时,高压氧治疗可能通过增强抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达来抑制脾细胞的凋亡,减少免疫细胞的耗竭,调控机体免疫功能状态,保持机体免疫平衡,以此改善急性重症胰腺炎。