斑叶兰提取物分析及应用研究

作     者：张婉菁 

作者单位：扬州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：胡荣;刘量

授予年度：2016年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：斑叶兰 化学成分 色谱分离 光谱鉴定 乳膏制备 

摘      要：斑叶兰(Goodyera schlechtendaliana Rchb.f.)为兰科斑叶兰属多年生草本植物,以全草入药,性平,味甘、辛,具有润肺止咳,补肾益气,行气活血,消肿解毒的功效。用于肺痨咳嗽,气管炎,头晕乏力,神经衰弱;外用治疗乳痈,疖疮,毒蛇咬伤,瘰疬,民间多有应用,但中国药典还未收载。关于其化学成分、药理作用、制剂、质量控制等方面有关的研究也鲜有报道,本文开展斑叶兰化学成分的分析及其应用,具体内容和结果如下：1.斑叶兰化学成分的提取分离和结构鉴定采用硅胶柱层析、ODS柱层析、Sephadex LH-20柱层析及半制备HPLC等多种色谱方法,对斑叶兰95%乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯萃取部分进行了分离纯化,获得7个单体化合物;结合1H-NMR、13C-NMR、MS数据及比对文献,鉴定了它们的结构,分别为：丁香醛(Ⅰ)、5-羟甲基糠醛(Ⅱ)、别欧前胡素(Ⅲ)、香草酸(Ⅳ)、阿魏酸(Ⅴ)、单棕榈酸甘油酯(Ⅵ)和β-谷甾醇(Ⅶ);其中Ⅱ-Ⅶ为首次从该属中分离得到,Ⅰ-Ⅶ为首次从该种植物中分离得到。2.斑叶兰提取物抗氧化活性考察利用DPPH法、铁氰化钾法对斑叶兰95%乙醇提取物石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及主要的单体成分进行了体外抗氧化活性筛选,以DPPH抑制率为考察指标,并分别测定了各部位总黄酮、总多酚含量;实验结果表明：阿魏酸对DPPH抑制率最强且清除自由基活性与维生素C清除自由基活性相当;三个部位中,乙酸乙酯部位对自由基清除率明显高于石油醚和正丁醇部位;FA和VA的还原力明显强于各萃取部位,乙酸乙酯部位的还原力在三个萃取部位中最强;乙酸乙酯部位的总黄酮、总多酚含量显著性高于石油醚和正丁醇部位(p0.05,p0.01)。采用正交实验法,以阿魏酸和斑叶兰浸膏得率作为评价指标,对斑叶兰提取工艺进行优化,确定斑叶兰最佳提取工艺为：提取溶剂70%乙醇,液料比12：1,提取次数3次,浸膏得率14.81%,每g浸膏相当于原药材6.75g。3.斑叶兰乳膏的制备利用上述最佳提取工艺,制备了斑叶兰乳膏制剂;并从外观性状、粒径、pH值、电位、主要成分含量等方面对斑叶兰乳膏制剂进行了质量方面的初步研究,结果表明：乳膏膏体细腻易涂展,为O/W型乳膏;分散相平均粒径为84.48nm,电位为-41.6mV, pH值为6.76;斑叶兰乳膏与阿魏酸,香草酸对照品在相同位置显现相同颜色的斑点;斑叶兰乳膏中阿魏酸含量为0.152%,香草酸含量为0.037%。本文从斑叶兰化学成分、抗氧化活性、提取工艺、乳膏制备及质量检查等方面对斑叶兰进行了初步的研究,该研究结果为将斑叶兰开发利用提供实验依据。