胸导管引流对重症急性胰腺炎合并肝损伤影响的实验研究

作     者：李少一 

作者单位：河北医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李勇;赵群

授予年度：2009年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：重症急性胰腺炎 肝损伤 TNF-a IL-10 胸导管引流 

摘      要：目的:重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是一种病情凶险、并发症多、易导致多器官功能衰竭(MODS)的外科常见急腹症。肝脏是人体最大的实质性腺体器官,血管极为丰富,既是物质代谢中心,又是重要的分泌、排泄、生物转化和屏障器官,还是多种凝血因子合成的场所。重症急性胰腺炎合并肝损伤治疗困难,死亡率高。目前,肠系膜-胸导管淋巴液在重度烧伤、感染中毒性休克等中的作用得到重视,并认为其可以介导严重感染/创伤等引起的脏器损伤。临床及动物实验发现各种原因引起的多器官功能障碍综合症常常包括肝脏损伤。在临床及动物实验中发现各种引起多器官功能障碍综合症的原因中常常包括肝脏损伤,肠系膜淋巴液可能起着介导肝损伤的作用;又有研究显示了休克后收集到的肠系膜淋巴液能损伤或致内皮细胞死亡,增加内皮细胞的渗透性,引流肠系膜淋巴液能减轻失血性休克后或烧伤后肺损害。据此,我们推测这种作用在类似烧伤和严重感染的重症急性胰腺炎合并肝损伤中也可能存在。因此本实验通过手术方法制备大鼠SAP模型,并在此基础上制作胸导管淋巴引流模型,观察胰腺及肝脏组织大体和病理改变;测定肝功能及胰腺酶学的变化;测定血液标本中各指标浓度的变化。研究分析胸导管淋巴引流时对SAP上述各指标的影响,以及其在SAP发病及早期的干预作用。探索颈部胸导管引流这一干预措施对实验动物的影响,为指导临床治疗提供实验依据。 方法:健康雄性SD大鼠96只,体重350-400g,随机分成四大组,四大组分别为:颈部假手术组+腹部假手术组(SO1)、颈部胸导管引流+腹部假手术组(SO2)、颈部假手术组+SAP组(SAP)、颈部胸导管引流+SAP组(TD)。每大组按2h、6h、12h时间点各分为3个小组,共12小组,每小组8只,采用经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备大鼠SAP模型,并在此基础上制备胸导管引流模型,建立经尾静脉给药途径。按设定时点进行胰腺、肝脏组织大体观察,测量腹水量,留取血液及组织标本,观察胰腺、肝脏组织病理改变;测定肝功能:ALT、AST、TBLL;血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)的变化、测定胰腺病理评分。通过酶联免疫法测定血清标本中TNF-a、IL-10的浓度。实验数据利用SPSS11.5软件进行统计学分析。 结果 一SAP时SD大鼠的变化: 1腹水情况:SAP各时点组均有大量红色或暗红色混浊腹水,腹水量在4-16ml之间,且腹水量随时间延长有明显增加(P0.01);2胰腺及肝脏病理形态学改变: 2.1大体观察:SAP各时点组胰腺存在不同程度充血水肿,片状出血及黑色坏死,散在皂化斑;以上情况随时间延长逐渐加重;2.2光镜下观察:胰腺:SAP各时点组可见程度不同的腺泡及间质水肿、片状出血及坏死,胰腺病理评分明显增高(P0.05);肝脏:SAP各时相组大鼠与腹部假手术各组相应时相组相比,肝脏明显增大,表面欠光滑,边缘变钝,颜色逐渐由暗红色转变为棕黄色,质地由软变硬。不同程度肝细胞水肿、汇管区炎细胞浸润、胶原结缔组织增生。并随时间延长,情况加重;3肝功能指标ALT、AST、TBIL、AMY、LIP的变化:SAP各时相组与腹部假手术各组相应时相组相比,ALT、AST、TBIL、AMY、LIP水平明显升高,差异有显著性(P0.01)。 4血清TNF-a、IL-10的变化: SAP各时相组与腹部假手术各组相应时相组相比,TNF-a、IL-10水平明显升高,差异有显著性(P0.01)。 二胸导管引流干预后的变化: 1腹水情况:与SAP组相比,各时点腹水量减少;2胰腺及肝脏病理形态学改变: 2.1大体观察:胰腺水肿、充血、坏死程度减轻,胰周脂肪囊皂化有不同程度减轻;肝脏增大不明显,表面相对平滑,质地较软;2.2光镜下观察:胰腺:干预后大鼠以水肿及点片状出血为主,炎细胞侵润程度减轻,坏死范围缩小,胰腺病理评分降低;肝脏病理变化减轻;肝细胞水肿、汇管区炎细胞浸润、胶原结缔组织增生明显减轻;3肝功指标ALT、AST、TBIL及胰腺AMY、LIP水平与SAP组相比明显降低(P0.05);4血清TNF-a、IL-10的变化:与SAP组相比,各时相组TNF-a水平明显降低(P0.05),随时间延长而呈升高趋势。IL-10水平明显降低(P0.01),随时间延长而呈升高趋势。 结论 1 SD大鼠SAP模型和在此基础上的胸导管引流模型的制备科学、可靠,可重复性好。 2 SAP时,胰腺及肝脏发生损伤性病理改变,其功能发生障碍,且随时间延长而加重,说明SAP时可并发肝脏病理性损伤及其功能障碍。随着SAP进展,血清TNF-a升高,IL-10升高,肝脏损伤性病