氨氯地平和缬沙坦对人冠脉内皮细胞NADPH氧化酶亚基gp91phox和p22phox表达的影响

作     者：卢挪挪 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：韩卫星

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：氨氯地平 缬沙坦 人冠脉内皮细胞 氧化应激 p22phox gp91phox 

摘      要：目的研究不同浓度的氨氯地平和缬沙坦对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91和p22的影响。方法取体外培养的30代之内的人冠脉内皮细胞,以1×105个/ml的密度接种到12个直径为100 mm细胞培养皿,予DMEM完全培养液(90%DMEM+10%FBS+青霉素100 U/ml+链霉素100 U/ml)培养。待细胞铺满整个培养皿底面积的80%,随机将细胞分为两组:氨氯地平组,根据所含药物浓度分为对照组、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L6组;缬沙坦组,根据所含药物浓度分为对照组、1×10-4mol/L、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L6组。分别在不同培养皿中加入含相应药物浓度1%FBS的完全培养液,对照组加入与实验组相同体积不含药物的1%FBS完全培养基,培养24 h后,收取细胞。根据膜蛋白提取试剂盒使用说明提取膜蛋白,用Bradford法测定膜蛋白浓度,用Western blot法测定不同药物浓度细胞膜中p22和gp91水平。Western blot结果目的条带应用软件Photoshop进行灰度分析计算。应用统计软件SPSS 13.0对数据进行统计分析,多组间样本均数的比较采用单因素方差分析,组间两两比较用SNK-q检验,P0.05为差异有统计学意义。结果不同浓度氨氯地平对HCAEC内NADPH氧化酶亚基p22表达均有促进作用(P0.05),高浓度氨氯地平对gp91有抑制作用(P0.05),低浓度则会促进gp91的表达(P0.05)。不同浓度缬沙坦对p22与gp91的表达均有显著的抑制作用(P0.05),且有随着药物浓度增高抑制作用增强的趋势(P0.05)。结论缬沙坦有抑制氧化应激的效力,并随浓度增高而增强,呈现浓度依赖的趋势;氨氯地平仅在高浓度时抑制部分NADPH氧化酶亚基(gp91)的表达,低浓度时反而可能增加氧化应激水平。