尿酸对帕金森大鼠保护作用及其机制的研究

作     者：巩利 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：罗蔚锋

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：帕金森病 尿酸 腹腔注射 大鼠 6-OHDA 神经保护 Akt/GSK-3 

摘      要：第一部分腹腔注射尿酸对大鼠血浆和脑组织尿酸水平的影响 目的：观察腹腔注射尿酸对大鼠体内尿酸水平的影响。 方法：70只雄性SD大鼠，随机分为生理盐水组和尿酸组（50mg/kg,100mg/kg, 200mg/kg,400mg/kg),每组14只，每天2次腹腔注射生理盐水或不同剂量的尿酸，连续注射10天’分别测定第5天和第W天第一次腹腔注射生理盐水或尿酸后大鼠尾静脉血及纹状体尿酸的水平。 结果：1.腹腔注射尿酸200mg/kg及以上时，大鼠血浆和纹状体中的尿酸水平显著增高，并呈剂量依赖性。2.腹腔注射尿酸200mg/kg，第5天和第W天测得的血浆中的尿酸水平分别提高了52.9%(从130.1±0.46u mol/L至丨J198.9±0.71umol/L)和55%(从142.5±0.49y mol/L到220.8±0.58u mol/L),纹状体中的尿酸水平分别提高了32.3%(从6.8±0.17nmol/mg到9.0±0.18nmol/mg)和36.8%(从6.9±0.13nmol/mg到9.5±0.12nmol/mg) o 结论：腹腔注射尿酸可以提高大鼠血浆和纹状体内的尿酸水平。 第二部分尿酸对6-OHDA-帕金森病大鼠的保护作用及机制 目的：探讨尿酸对6-轻基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA)致帕金森病大鼠黑质纹状体系统多巴胺能神经元的保护作用及机制。 方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组，尿酸+假手术组，6-OHDA组，尿酸+6-OHAD组，每组15只，予连续腹腔注射生理盐水或尿酸（200mg/kg)5天，于第6天第1次腹腔注射生理盐水或尿酸后，在立体定向仪指导下，右侧纹状体内两点注射6-羟基多巴胺或生理盐水，此后继续给予大鼠腹腔注射生理盐水或尿酸5天。注射6-?基多巴胺后第〗，2，3,4，5周分别进行前肢功能测定。注射6-羟基多巴胺后第5周进行免疫组织化学检测纹状体和黑质内酪氨酸羟化酶（TH)表达，蛋白印迹法检测大鼠纹状体TH、Akt/pAkt(ser473)及其下游糖原合成酶激酶GSK-3P/磷酸化糖原合成酶激酶pGSK-3P (ser9)的表达。 结果：1.注射6-羟基多巴胺后第4，5周左前肢跨步数较假手术组明显减少(p0.05),尿酸+6-OHDA组较6-0HDA组明显增加（p0.05)。2.6-0HDA组右侧黑质多巴胺能神经元数目较假手术组明显减少（P0.01)，尿酸+6-0HDA组右侧黑质多巴胺能神经元较6-OHDA组明显增多（P0.05)。3.6-OHDA组右侧纹状体多巴胺神经元纤维末梢较假手术组明显较少;而尿酸+6-0HDA组较6-0HDA组明显增多。4.6-0HDA组毁损侧纹状体TH含量较假手术组明显降低，降低了72.8%，（p0.01)，尿酸+6-OHDA组与假手术组相比仅降低了46.2%(p0.05)。5.6-OHDA组毁损侧纹状体中p-AKT(Ser473)和p-GSK3P (Ser9)的表达水平较假手术组明显降低(p0.01)，尿酸+6-OHDA组较6-OHDA组明显升高（p0.05)。 结论:尿酸能减轻6-OHDA对SD大鼠黑质纹状体系统多巴胺神经元的毒性作用，其机制可能与调节Akt/GSK-3P信号通路相关。