巨噬细胞炎性蛋白-1α在病毒性心肌炎小鼠中的表达及意义

作     者：郭佳 

作者单位：南华大学 

学位级别：硕士

导师姓名：殷小成

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：巨噬细胞炎性蛋白-1α 病毒性心肌炎 白细胞介素-1β 肿瘤坏死因子-α 

摘      要：目的巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）是趋化因子中CC亚家族成员，可特异性地趋化单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞向炎症部位迁移，参与许多炎症性疾病的发生发展过程。本实验研究MIP-1α在病毒性心肌炎（VM）小鼠心肌和血清中表达的动力学特征，探讨其在VM发病学中的作用。 方法取Balb/c小鼠75只，随机分为两组，心肌炎组65只，对照组10只。心肌炎组小鼠每只腹腔注射0.1mL内含1×10～2TCID50柯萨奇B3病毒（CVB3）的Eagle’s培养液，对照组小鼠每只腹腔注射不含病毒的Eagle’s培养液0.1mL。心肌炎组分别于接种病毒后3、7、15、30d随机取10只小鼠，对照组小鼠于接种后30d，称体重（BW）后处死，摘取心脏并称重（HW），计算HW/BW，并留取血清标本。HE染色观察心肌病理改变，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blotting分别检测各组小鼠心肌MIP-1α mRNA及蛋白表达，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清MIP-1α浓度及心肌白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量，并对心肌炎组MIP-1α蛋白表达及血清MIP-1α浓度与心肌病变积分进行相关性分析。 结果 1.心肌炎组小鼠死亡率为38.46%（25/65），对照组小鼠无死亡。 2．对照组小鼠心肌组织形态正常;心肌炎组感染后3d心肌无炎性细胞浸润，7、15、30d心肌组织均出现心肌坏死、炎性细胞浸润等病理改变，其中以7d最明显。 3.心肌炎组7～30d各时点HW/BW均明显高于对照组（P0.05） 4．心肌炎组接种病毒后7、15、30d血清MIP-1α浓度均显著高于对照组（P0.05）。 5．对照组小鼠心肌组织有一定量的MIP-1α mRNA表达，心肌炎组接种病毒后7、15、30d其表达水平升高，与对照组比较，差异均有显著性（P0.05）。 6．对照组MIP-1α蛋白呈弱表达，心肌炎组小鼠于感染后7d MIP-1α表达最明显，15～30d其表达逐渐下降，但仍高于对照组（P0.05） 7．心肌MIP-1α蛋白表达水平与心肌病理积分的相关性：心肌炎组心肌MIP-1α蛋白表达水平与心肌病理积分呈显著正相关（r=0.82,P0.05）。 结论 ***-1α可能参与VM发病过程，其机制可能与促进炎症细胞向心肌浸润及增加IL-1β、TNF-α分泌有关;2．血清MIP-1α浓度能反映心肌炎的严重程度，可作为心肌炎病情判断的一个血清学指标。