Oxythiamine对人肺腺癌细胞株A-549增殖及凋亡的影响

作     者：牛聪 

作者单位：复旦大学 

学位级别：硕士

导师姓名：朱惠莉

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：Oxythiamine 人肺腺癌细胞株A-549 增殖抑制 细胞凋亡 

摘      要：目的：研究Oxythiamine对人肺腺癌细胞株A-549体外生长和凋亡的影响,并初步探讨可能的作用机制。 方法： 1利用倒置显微镜观察人肺腺癌A-549细胞株经Oxythiamine培养后细胞形态学的改变;2分别用不同浓度Oxythiamine(0、0.2、2、20、200μmol/l)干预人肺腺癌A-549细胞株,细胞增殖与毒性检测法(CCK8)检测OD值,计算对照组和各实验组A-549细胞株的增值活性;3判断细胞的死亡形式：用Annexin V/PI双染法进行流式检测,判断Oxythiamine诱导A-549细胞的死亡是否为凋亡。 结果： 1经Oxythiamine培养24h后人肺腺癌A-549细胞变圆,贴壁能力降低,细胞之间连接变得不紧密,坏死细胞数明显增多;2CCK-8法检测结果显示,Oxythiamine在体外能显著抑制人肺腺癌A-549细胞的增殖,并且呈浓度、时间依赖关系,在Oxythiamine浓度为200μmol/l干预48h后有最大抑制效应(P0.001);3Annexin V-FITC/PI双荧光染色流式细胞术检测显示,如图2-2、2-4、2-6所示,对照组、Thiamine组细胞凋亡率处于较低水平,随着Oxythiamine处理剂量的增加或干预时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,呈现出一定的剂量和时间依赖性关系,Oxythiamine干预A-549细胞48h后,与对照组相比,2、20、200μmol/l实验组细胞凋亡率(早期凋亡+晚期凋亡)显著增加,凋亡率分别为(22.977±1.333)%、(27.320±3.610)%、(31.447±2.566)%(P0.01)。表明Oxythiamine可通过诱导细胞凋亡抑制人肺腺癌A-549细胞的增殖。 结论: 外源性Oxythiamine对人肺腺癌细胞株A-549有抗增殖活性,并且这种效应呈时间—浓度依赖关系;对人肺癌细胞株A-549添加外源性Oxythiamine培养后,出现明显的凋亡增加,这提示Oxythiamine的抑制作用可能是通过抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡而发挥的。