局灶性脑缺血再灌注后IL-6、TNF-α的表达和海马CA1区超微结构改变及川芎嗪的保护机制

作     者：林海 

作者单位：中国人民解放军第四军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王者晋

授予年度：2003年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：海马CAI区 缺血/再灌注 白细胞介素一6肿瘤坏死 因子一α 超微结构 大鼠 

摘      要：目的： 局灶性脑缺血再灌注既可挽救濒临梗死的神经细胞，又可加重神经细胞的损伤甚至死亡。近年来的研究表明，局灶性脑缺血再灌注损伤中炎症机制愈来愈受到关注，其中细胞因子的作用至关重要。中药川芎嗪具有扩张血管、抑制血小板聚集、改善微循环、抗脂质氧化等作用，但是否可以通过影响细胞因子而起到一定的脑保护作用未见报道。本研究通过放免法观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后各时相的IL-6、TNF-α表达及中药川芎嗪对IL-6、TNF-α表达的影响，以及相应时相海马CA1区超微结构的改变，以探讨上述问题。 方法： 1、用颈外动脉插入线栓法制备大鼠短暂脑缺血／再灌注模型，实验组，术前腹腔注射川芎嗪;对照组，术前腹腔注射生理盐水。 2、取脑缺血I-0.5h、再灌注R-1h、R-3h、R-6h、R-12h等5个时相点，作大鼠脑组织匀浆，用放射免疫分析法测定标本中的IL-6及TNF-α水平。 3、实验组、对照组取缺血再灌注6h、12h各2各时相点，用电镜观察海马CA1区超微结构的改变。 结果： 1、IL-6的变化 假手术组脑组织中未检测出IL-6;对照组I-0.5h及R-1h、R-3h、R-6h见到IL-6表达，但无显著差异，而在12h时IL-6表达却显著增高(P0.05);实验组的I-0.5h、R-1h及R-3h的IL-6表达与对照组相比无显著差异(P0.05)，但在R-6h时IL-6表达与同组间相比较显著增高(P0.05)，同时与对照组相比亦有显著差异(P0.05);R-12h两组相比仍有显著差异(P0.05)。 2、TNF-α的变化 大鼠I-30分钟时，对照组及实验组脑组织TNF-α 第四军医大学硕士学位论文 的水平较假手术组已有所增高（P0刀5），脑缺血再灌注各时相的增幅较之 再灌注前更明显（P0刀5），R－12h表达最明显。各时相间，实验组的 yF a的水平与假手术组比较虽有所增加，但与对照组相比TNF a的水平却明 显降低（P0刀5）。 3、超微结构的改变 实验组海马 CA区超微结构的改变总体较对照组 明显减轻，表现为：再灌注6h星形胶质细胞，突起稍肿胀，线粒体结构无 明显变化：神经细胞内仅部分线粒体肿胀，内质网扩张。再灌注12h星形胶 质细胞，突起肿胀，线粒体结构无明显变化;未与星形胶质细胞相连之神经 细胞，胞浆内线粒体肿胀、轴突内线粒体空泡化;与星形胶质细胞相连神经 细胞，内质网脱颗粒，线粒体无明显改变。 结论： T’NF a加重脑缺血再灌注损伤;IL－6可能作为一种脑缺血后神经细胞 死亡的内生桔抗剂，起到神经保护作用;）0芍喷可抑制脑缺血再灌注后TNF a的表达，保护海马以 区星形胶质细胞，使IL－6的表达提前，可能是川 苇嗓对抗脑缺血再灌注损伤的机制之一。