壳聚糖成膜剂联合EGF在兔深Ⅱ度烫伤创面愈合的实验研究

作     者：杨震 

作者单位：泸州医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：郭力

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：壳聚糖 表皮生长因子 烫伤 联合 

摘      要：目的：本实验通过离体细胞水平和建立兔深Ⅱ度烫伤自身对照模型，研究壳聚糖成膜喷剂联合表皮细胞生长因子喷雾剂（EGF）对兔深Ⅱ度烫伤创面的早中期的治疗效果及其创面愈合的相关影响机制。通过观察创面愈合的大体肉眼观、创面愈合率的计算、痂下细菌计数、创面病理学观察、创面组织羟脯氨酸(Hyp）含量变化、ki67在创面的分布和表达水平，探讨联合用药在烫伤早中期治疗的协同优势及其应用前景。 方法：选取健康清洁级新西兰大白兔24只，以兔脊柱为中间线在背部两侧用水烫法建立6个对称的兔深Ⅱ度烫伤创面，上端两个创面为实验组（A组：壳聚糖成膜剂联合EGF组），中间两个创面为对照组1（B组：EGF组），下端两个创面为对照组2（C组：壳聚糖组），A组致伤后，先将EGF喷涂于创面，至药液不外流为止，1分钟后再将壳聚糖喷涂于创面，待其自然成膜后，包扎固定。B组致伤后,仅在创面喷涂EGF至药液不外流为止，包扎固定。C组致伤后，仅在创面喷涂壳聚糖，待其自然成膜后，包扎固定。每24h创面再次给药，更换外敷料，肉眼观察三组创面大体形态变化及愈合情况。选取3d、7d、10d、14d四个观察时相点，每个时相点随机抽取6只兔子，将抽取的6只兔子空气栓塞处死，用称量纸描绘计重得出创面面积并计算创面愈合率。在严格无菌操作下，切取烫伤创面焦痂及痂下组织块1.0g，处理后行培养，计算每克创面组织的细菌群落总数。再取兔子背部创面100mg组织，处理后行组织羟脯氨酸（Hyp）含量测定。剩余的标本组织一部分切片HE染色后观测病理学指标，一部分标本行ki67特异性抗体染色后观察免疫组化指标。结果：创面大体观察，A组创面较B、C两组创面，创周炎性反应轻，痂壳松软，创面缩小速度快。创面愈合率的比较，A组明显高于B、C两组，B、C两组之间的差异则不明显。创面组织病理学标本镜下观察见，A组创面较B、C两组创面，坏死组织与创面附着松散，炎性细胞趋化聚集速度快，内皮细胞增生明显，胶原纤维增生活跃，新生上皮排列整齐。痂下细菌菌落数（CFU/g）阳性检出率A组阳性检出率低于B组，B组高于C组，A、B两组差异不明显。组织羟脯氨酸（Hyp）含量检测，A组Hyp含量增长速度快于B组，C组优于B组，A、C两组之间差异不大。ki67免疫组化分析，A组创面较B、C两组创面，阳性细胞聚集紧密，量多，着色深，排列整齐。ki67指数阳性率比较，A、B两组之间差异不明显，A、B两组与C组的差异均较明显。结论：两种药物联合使用能够加强兔深Ⅱ度烫伤创面的愈合能力，并能弥补单一用药的缺陷。能全面发挥其抑制创面细菌生长，加快上皮细胞增殖生长，促进胶原蛋白的合成的作用。