抑郁症中糖皮质激素受体与调节性T细胞关联作用导致免疫失衡的研究

作     者：邱雯静 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：肖波;杨欢

授予年度：2007年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100205[医学-精神病与精神卫生学] 10[医学] 

主      题：抑郁症 糖皮质激素受体 CD4+CD25+T调节细胞 Foxp3 IL-10 TGF-β 

摘      要：目的 1．研究抑郁症患者外周血CD4CD25Treg的数量及其特征性标志Foxp3的表达与糖皮质激素受体的表达之间的关系，探讨抑郁症中糖皮质激素受体与CD4CD25Treg的关联作用。 2．探讨抑郁症患者外周血清中细胞因子IL-10、TGF-β的变化及它们在糖皮质激素受体与CD4CD25Treg关联导致免疫失衡中的作用。 方法 1．根据中国精神疾病诊断标准CCMD3、美国精神障碍诊断和统计手册(DSM-Ⅳ)诊断标准筛选临床抑郁患者。Zung氏抑郁自评量表(SDS)、Hamilton抑郁量表评定病情轻重程度。36例抑郁患者中轻度9例，中度12例，重度15例。与实验组相匹配的社区内正常样本36例，保证各组年龄、性别、应激因素方面差异无统计学意义。 2．采用RT-PCR技术检测轻、中、重度抑郁以及正常对照组GRα、GRβ、Foxp3 mRNA表达水平。 3．采用免疫磁珠技术从各组样本外周血单个核细胞中分离CD4CD25Treg并计数，计算其在CD4T细胞中的比例。 4．采用ELASA法测定各组样本血清中细胞因子IL-10、TGF-β的浓度。 5．采用间接免疫荧光法同时标记CDCDTreg上的Foxp3与GR在激光共聚焦显微镜下直接观察Foxp3与GR在CDCDTreg上的共表达。 6．对结果进行统计学分析，成组设计的多样本间均数的比较验证方差齐性后，使用方差分析及S-N-K两两比较。两指标间关系使用相关分析。 结果 1．抑郁组，尤其是重度抑郁患者外周血CDCDTreg数量(8.3±1.6×10／L)及在CDT细胞中的比例(3.01±0.69％)明显少于正常组(20.0±2.6×10／L，5.80±1.26％)。且随着抑郁程度的加重，该细胞数量及在CD4T细胞中的比例减少。 2．抑郁各组GRamRNA、Foxp3 mRNA表达水平均低于正常组，且随抑郁程度加重表达降低。但GRβmRNA在正常对照组，轻、中度抑郁组内几乎不表达，分别只有1例阳性结果，在重度抑郁组，有9例呈阳性表达。 3．血清中IL-10、TGF-β浓度随抑郁程度加重而降低。 4．激光共聚焦显微镜下观察CD4CD25Treg上GR与Foxp3共表达，发现GR表达于细胞胞浆及胞核中，Foxp3主要表达于细胞核中。与正常对照相比，重度抑郁患者CD4CD25Treg上GR与Foxp3表达显著减少。 5．相关分析结果显示，Foxp3 mRNA与GRamRNA的表达，Foxp3mRNA的表达与CD4CD25Treg的数量及其在CD4T细胞中的比例，GRαmRNA的表达与IL-10、TGF-β的浓度，Foxp3 mRNA的表达与IL-10、TGF-β浓度均存在正相关关系。 结论 1．抑郁症患者体内存在免疫激活，GR表达减少在该免疫失衡中起重要作用。 2．抑郁症CD4CD25Treg的GR表达减少，是造成抑郁症免疫激活的重要原因之一。 3．细胞因子IL-10、TGF-β是神经-内分泌-免疫网络中的重要组成部分。