Sulfiredoxin基因敲低对HeLa细胞恶性生物学行为的影响

作     者：王珊 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王辉

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：Sulfiredoxin siRNA 宫颈癌 恶性生物学行为 

摘      要：目的：探讨干扰Sulfiredoxin(Srx)基因表达对宫颈癌HeLa细胞恶性生物行为学的影响。方法：本实验选取宫颈癌HeLa细胞株,分为Wild-Type(WT)组,Non-Target(NT)组, Knock-Down (KD)组。利用siRNA技术干扰Srx在 HeLa细胞中的内源性表达,利用Real-Time PCR及Westernbolt鉴定干扰效果。首先,利用DCFH-DA标记的荧光探针测定干扰Srx表达后对HeLa细胞内ROS水平的影响,而后分别采用MTT法、平板克隆形成实验、transwell实验及流式细胞术分别检测三个不同处理组HeLa细胞增殖力,体外成瘤能力,浸润、迁移能力,细胞周期及凋亡率。最后采用小管形成实验及血管拟态实验观察干扰Srx后对内皮细胞血管形成能力的影响。结果：与两对照组比较,KD组HeLa细胞Srx表达在mRNA和蛋白质水平均显著被抑制。KD组细胞内ROS水平及凋亡率显著增加(P0.05)。结论：实验结果表明Srx对HeLa细胞多种恶性生物学行为具有促进作用,说明其与宫颈癌发生及进展有密切关系。