瑞舒伐他汀对ApoE-/-小鼠心肌、主动脉SIRT1信号通路的影响
作者单位:济南大学
学位级别:硕士
导师姓名:王志蕴
授予年度:2014年
学科分类:1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学]
主 题:动脉粥样硬化 SIRT1 NLRP3 ApoE-/- 瑞舒伐他汀
摘 要:目的 1.通过高脂饲养ApoE-/-小鼠,观察小鼠心脏是否受到氧化应激损伤和SIRT1、p-FOXO3a蛋白在心肌中的表达变化,及瑞舒伐他汀对该通路的影响。 2.通过高脂饲养ApoE-/-小鼠,观察NLRP3炎性体与SIRT1蛋白在小鼠主动脉粥样硬化斑块中的表达及瑞舒伐他汀的干预作用,初步探究脂质负荷、炎症发应、动脉粥样硬化之间的关系。 方法 随机选取10只健康雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,给予普通饮食;同时选取同品系ApoE-/-健康雄性小鼠20只,随机分为模型组和干预组,每组各10只,均给予高脂饲料喂养,干预组给予瑞舒伐他汀悬液灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。连续喂养16周,所有小鼠处死,全自动生化仪检测血清血脂,硫代巴比妥酸法及NBT法检测心脏组织匀浆中MDA、SOD含量。将心脏、主动脉组织做病理切片,HE染色观察各组小鼠心肌细胞形态变化、主动脉斑块形态,WesternBlot法检测各组小鼠心肌细胞SIRT1、p-FOXO3a蛋白的表达,及主动脉NLRP3、Caspase-1蛋白含量。免疫组化法检测各组小鼠心肌SIRT1蛋白、主动脉粥样斑块SIRT1、Bcl-2蛋白的表达。 结果 1.与对照组相比,模型组血清TC、TG、LDL-C含量明显升高(P0.05),HDL-C降低(P0.05);心肌组织匀浆中SOD降低,MDA增多(P0.05);心肌细胞粗大、排列紊乱,胶原增多;心肌组织中SIRT1、p-FOXO3a表达减少(P0.05)。主动脉可见明显粥样斑块;SIRT1、Bcl-2表达减少,Caspase-1及NLRP3表达增多(p0.05)。 2.与模型组相比,干预组小鼠血清TC、TG、LDL-C明显降低(P0.05),HDL-C明显升高(P0.05);心肌组织匀浆中SOD增多,MDA降低;心肌细胞排列整齐,胶原减少;心肌组织中SIRT1、p-FOXO3a含量增加(P0.05)。主动脉粥样斑块面积减小,SIRT1及Bcl-2表达增多,而Caspase-1及NLRP3表达减少(p0.05)。 结论 1.高脂饮食下ApoE-/-小鼠心脏易发生氧化应激损伤,瑞舒伐他汀可通过上调SIRT1、p-FOXO3a保护心脏免受氧化应激损伤。 2.高脂饮食诱导下的ApoE-/-小鼠动脉粥样斑块内胆固醇结晶沉积可激活NLRP3炎性体通路及其下游Caspase-1,炎性体使SIRT1失活,导致血管壁细胞易发生损伤;瑞舒伐他汀可通过显著调脂作用减少胆固醇结晶在动脉壁的沉积,从而抑制NLRP3炎性体通路,上调SIRT1,增加抗凋亡蛋白,发挥抗AS作用。***1蛋白在小鼠体内多器官表达,发挥抗炎、抗氧化应激的保护作用。