热疗对兔VX2肿瘤细胞转移的影响
作者单位:第四军医大学
学位级别:硕士
导师姓名:程庆书
授予年度:2006年
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
主 题:透热疗法 兔 肿瘤细胞,培养的 肿瘤转移 基质金属蛋白酶 血管内皮生长因子
摘 要:目的 建立兔VX2细胞系,并研究热疗对兔VX2肿瘤的体外侵袭力的影响。 方法 采用组织块法和消化法结合对兔VX2肿瘤进行原代培养,体外传代观察,传代40次并对培养细胞进行形态学观察、细胞周期检查、核型分析、兔及裸鼠移植。实验组将VX2肿瘤细胞43℃加热1小时,对照组于37℃下培养,48小时后用MTT检测细胞增殖率,进行体外侵袭实验测定其体外侵袭能力,用免疫组化SABC法观察加热对兔VX2肿瘤细胞MMP-2和VEGF表达的影响。 结果 纯化的兔VX2肿瘤细胞形态一致,呈圆形、多角形的上皮细胞,体积小,核浆比倒置,体外连续培养8个月,传代50次以上,细胞倍增时间为26.4h,细胞周期测定G1期为74.61%,G2期为7.78%,S期为17.6%。染色体为亚三倍体核型,众数为60条。高细胞浓度可保证同种移植成瘤率,裸鼠移植可成瘤,无支原体污染。MTT法增殖能力检测发现细胞受热后增殖能力明显下降(P0.01)。体外侵袭实验发现细胞受热后其外迁移能力明显下降(P0.01)。免疫组织化学染色发现,加热后细胞MMP-2和VEGF的表达减少。