拟南芥铜锌超氧化物歧化酶解聚的中间态性质

作     者：刘祚军 黄胜威 李明浩 吴丽芳 LIU Zuojun;HUANG Shengwei;LI Minghao;WU Lifang

作者机构：中国科学院合肥物质科学研究院合肥230031 中国科学院大学北京100049 安徽省农业科学院农业工程研究所合肥230001 

出 版 物：《生物学杂志》 (Journal of Biology)

年 卷 期：2020年第37卷第6期

页      面：51-54页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：合肥物质科学技术中心方向项目培育基金(2012FXCX006) 安徽省农科院学科建设项目(17A1329) 

主　　题：铜锌超氧化物歧化酶 二聚体 差式扫描量热法 

摘      要：拟南芥铜锌超氧化物歧化酶(AtSOD1)是理想的研究植物SOD酶结构与功能关系的模式蛋白,对于理解植物抗逆性有着重要的意义。目前对该酶稳定性、活性等基本性质了解得不够充分,影响了相关研究的开展。研究在大肠杆菌中异源表达出具有生物活性的AtSOD1蛋白,通过电子顺磁共振波谱(EPR)检测,活性中心电子结构准确。对AtSOD1的稳定性进行研究,其中,AtSOD1的尿素解折叠实验的圆二色谱(CD)结果发现,在225 nm附近出现了一个α-螺旋和β-折叠比例变化的拐点,且当尿素浓度为4~5 mol/L时,天然态AtSOD1解折叠曲线出现了一个平台期。在利用差示扫描量热(DSC)检测天然态AtSOD1的物理稳定性时发现,该酶在单体重构为二聚体过程中,也存在两个Tm值,分别为102.2℃和100.5℃。根据上述结果,推测认为,AtSOD1从二聚体解聚为单体过程中存在一个中间态,与该酶结构稳定性有关。