Ni-NTA蛋白芯片技术检测间日疟原虫感染的体液免疫应答

作     者：陈军虎 王越 坪井敬文 韩银泽 CHEN Jun-hu;WANG Yue;TSUBOI Takafumi;HAN Eun-taek

作者机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所上海200025 200-701春川韩国国立江原大学医学院寄生虫学研究室 浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013 790-8577松山日本爱媛大学无细胞技术研究中心和风险事业实验室 

出 版 物：《国际医学寄生虫病杂志》 (International JOurnal of Medical Parasitic Diseases)

年 卷 期：2011年第38卷第3期

页      面：129-134页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：Korean Science and Engineering Foundation(KOSEF)Grant Funded by the Korea Government(MOST)(R01-2007-000-11260-0) National Research Foundation of Korea Grant Funded by the Korean Government(2009-075103) the Program for National Science & Technology Major Program of China(2008ZX10004-011) 

主　　题：间日疟原虫 体液免疫 蛋白芯片 

摘      要：目的建立检测间日疟感染的Ni—NTA蛋白芯片技术。方法采用无细胞蛋白合成体系表达间日疟原虫重组蛋白，建立原位纯化重组蛋白和检测间t3疟原虫感染患者血清中抗体反应的M—NTA蛋白芯片技术。并对3个裂殖子表面蛋白（merozoitesurfaceproteins，MSPs）MSP1-42、MSP8和MSP10的免疫应答进行分析。结果应用Ni—NTA蛋白芯片技术检测间日疟原虫感染患者血清抗体，鉴定出具有免疫原性的15个间日疟原虫蛋白，主要包括10个MSPs、2个Cys6蛋白以及其他3个未知蛋白，结果与以往报道的抗体芯片类似。MSP1-42、MSP8和MSP10依次识别出100．0％（20／20）、90．0％（18／20）和70．0％（14／20）的间日疟原虫感染患者血清，特异性均为100％（10／10），且曲线下面积（area under the curve，AUC）达到0．87—1．00。结论成功建立了检测间日疟原虫感染的Ni—NTA蛋白芯片技术。该方法有助于从间日疟原虫基因组中快速筛选鉴定具有免疫原性的蛋白以及应用于功能蛋白质组学研究。