欧亚旋覆花总黄酮对衰老人皮肤成纤维细胞lncRNA TERRA的影响及其机制

作     者：周茂强 况杰 胡翰林 果磊 Zhou Mao-Qiang;Kuang Jie;Hu Han-Lin;Guo Lei

作者机构：重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科重庆400016 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2020年第45卷第11期

页      面：1117-1124页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：重庆市科卫联合中医药科研项目(2019ZY023405)。 

主　　题：欧亚旋覆花总黄酮 lncRNA TERRA 衰老 端粒 

摘      要：目的探讨欧亚旋覆花总黄酮(IBFTF)对衰老人皮肤成纤维细胞lncRNA TERRA的影响及其机制。方法采用高效液相色谱法(HPLC)分析IBFTF的成分及含量。将人皮肤成纤维细胞分为对照组、IBFTF组(使用IBFTF处理)、衰老模型组[使用D-半乳糖(D-gal)诱导建立衰老模型]与衰老模型+IBFTF组(衰老模型建立后使用IBFTF处理)。采用CCK-8法检测各组细胞存活率;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察细胞蓝染情况,计算阳性细胞比例;酶标仪测定各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)等氧化应激指标水平;qRT-PCR检测各组lncRNA TERRA、Telomere、人端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA的表达;Western blotting检测各组hTERT及衰老相关蛋白p53、p16的表达。结果IBFTF中槲皮素、异鼠李素、山奈酚和芦丁的含量分别为6.447、2.044、1.272、0.781 mg/g。CCK-8法及SA-β-Gal染色结果显示,IBFTF可增高衰老模型组细胞存活率,降低SA-β-Gal阳性细胞比例(P0.05)。酶标仪检测结果显示,IBFTF可增加衰老细胞SOD、GSH-Px的活性,降低衰老细胞MDA含量(P0.05)。qRT-PCR检测结果显示,IBFTF可降低衰老细胞lncRNA TERRA的表达水平,增高hTERT mRNA的表达水平,延长端粒长度(P0.05)。Western blotting检测结果显示,与衰老模型组比较,衰老模型+IBFTF组p53、p16蛋白表达水平降低,hTERT蛋白表达水平升高(P0.05)。结论IBFTF可降低D-gal诱导的衰老人皮肤成纤维细胞lncRNA TERRA的表达,发挥抗衰老作用,其机制可能与恢复端粒酶活性、延长端粒长度有关。