樟树ISSR-PCR反应体系优化研究

作     者：邢建宏 陈存及 张国防 彭东辉 刘宝 陈碧华 XING Jian-hong;CHEN Cun-ji;ZHANG Guo-fang;PENG Dong-hui;LIU Bao;CHEN Bi-hua

作者机构：福建农林大学林学院福建福州350002 福建省林业科学研究院福建福州350012 

出 版 物：《福建林业科技》 (Journal of Fujian Forestry Science and Technology)

年 卷 期：2006年第33卷第3期

页      面：96-100页

学科分类：0907[农学-林学] 08[工学] 0829[工学-林业工程] 09[农学] 

基　　金：福建省林业厅种苗攻关项目(200306) 

主　　题：樟树 ISSR PCR反应体系优化 

摘      要：以樟树基因组DNA为材料,分析了影响樟树ISSR-PCR的主要参数,确立了适用于樟树的ISSR反应体系和扩增条件。结果表明获得清晰、重复性高的樟树ISSR-PCR扩增条件为:20μL PCR反应体积中,1×PCR Buffer(10 ***,pH8.3,50 ***-1KCl),2.0 ***-1MgCl2,200μmol.L-1dNTPs,50 ng模板DNA,200 ***-1引物,0.5 UTaq DNA聚合酶。在扩增过程中,引物的适宜退火温度比其Tm值平均高3℃。这为今后利用ISSR标记技术开展樟树种间遗传多样性分析提供参考。