三角帆蚌中WNT4基因克隆及表达分析

作     者：刘斐斐 崔晓羽 董赛赛 段胜华 汪桂玲 李家乐 LIU Feifei;CUI Xiaoyu;DONG Saisai;DUAN Shenghua;WANG Guiling;LI Jiale

作者机构：上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学上海市水产养殖工程技术研究中心上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 

出 版 物：《上海海洋大学学报》 (Journal of Shanghai Ocean University)

年 卷 期：2020年第29卷第6期

页      面：801-810页

核心收录：

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31772835) 国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”专项(2018YFD0901406) 

主　　题：三角帆蚌 性别决定 WNT4 qRT-PCR 原位杂交 

摘      要：为进一步了解WNT4在三角帆蚌性别决定过程中的作用,通过RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆获得了三角帆蚌WNT4基因的全长cDNA,共1560 bp,其中5′-UTR 396 bp、3′-UTR 24 bp,开放阅读框(ORF)为1140 bp,可以编码379个氨基酸,且该序列含有WNT家族特有结构域。对WNT4的氨基酸序列进行同源性分析后,发现该基因在物种间的进化关系和结构功能具保守性。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析发现WNT4基因在三角帆蚌雌雄多个组织(外套膜、闭壳肌、鳃、性腺、斧足和肝)中均有表达,表明其参与了多样的生物学过程,在鳃、斧足和肝中表达量较高,在性腺、闭壳肌和斧足中雌雄间有显著性差异,且雌性三角帆蚌的性腺、闭壳肌表达量显著高于雄性。原位杂交结果显示,WNT4在雌性三角帆蚌的卵母细胞上有明显的杂交信号,推测WNT4基因与性别决定相关。