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过表达miR-497靶向细胞周期蛋白E1抑制肺癌A549细胞的上皮间质转化

miR-497 over-expression inhibits epithelial-mesenchymal transition in lung cancer A549 cells by targeting cyclin E1

作     者:齐见旭 王心晓 李英 欧宗兴 QI Jianxu;WANG Xinxiao;LI Ying;OU Zongxing

作者机构:海口市人民医院呼吸内科海南海口570000 海口市人民医院重症医学科海南海口570000 

出 版 物:《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期:2020年第27卷第11期

页      面:1239-1245页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主  题:miR-497 细胞周期蛋白E1 肺癌 A549细胞 上皮间质转化 

摘      要:目的:探讨过表达miR-497靶向细胞周期蛋白E1(cyclin E1,CCNE1)对肺癌A549细胞上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响。方法:常规培养人肺癌A549细胞,细胞实验分为正常组(不加干预)、对照组(转染miR-497 mimics-NC)、实验组(转染miR-497 mimics)。采用Transwell小室实验、免疫荧光染色、qPCR、Western blotting法分别检测各组细胞迁移和侵袭能力、蛋白间质标志物α-SMA和上皮标志物E-cadherin的表达、miR-497和CCNE1的表达水平,荧光素酶基因基因报告实验验证miR-497和CCNE1的靶向关系。结果:与对照组和正常组相比,实验组A549细胞迁移和侵袭的数量明显减少(均P0.05),细胞的间质标志物α-SMA的绿色荧光强度明显减弱[(36.95±5.81)vs(98.69±2.36)、(97.94±2.63),均P0.05],上皮标志物E-cadherin的绿色荧光强度明显增强[(388.41±10.93)vs(100.95±6.37)、(102.55±3.18),均P0.05],miR-497的表达明显升高(均P0.05),CCNE1的表达均明显下降(均P0.05)。miR-497能够靶向调控CCNE1的表达。结论:在肺癌A549细胞中miR-497能够靶向调控CCNE1的表达,上调miR-497的表达后能明显抑制A549细胞迁移和侵袭能力,影响EMT相关蛋白的表达。

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