人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖和细胞因子分泌的影响及机制研究

作     者：李芳宇 齐滨 边帅 赵月 卢姝言 王佳雯 赵大庆 LI Fangyu;QI Bin;BIAN Shuai;ZHAO Yue;LU Shuyan;WANG Jiawen;ZHAO Daqing

作者机构：长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学人参科学研究院长春130117 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2020年第31卷第21期

页      面：2597-2602页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家重点研发计划项目(No.2017YFC1702100) 吉林省教育厅“十三五”科学技术项目(No.JJKH20190478KJ)。 

主　　题：人参根提取物 脾淋巴细胞 自噬 细胞因子 免疫增强作用 

摘      要：目的:研究人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖及细胞因子分泌的影响,并研究其作用机制。方法:将小鼠脾淋巴细胞分为空白对照组、阳性对照组(刀豆蛋白A,5μg/mL)和不同质量浓度人参根提取物组(32、125、500μg/mL,以冻干粉末计)。各组细胞加入相应药物培养48 h后,分别采用吖啶橙染色法检测细胞的自噬情况;采用CCK-8法检测细胞的增殖情况;采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液中白细胞介素4(IL-4)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链β3(LC3B)、酵母ATG6同源物(Beclin-1)的表达水平以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化水平。结果:与空白对照组比较,32、125、500μg/mL人参根提取物均能够增加小鼠脾淋巴细胞酸性自噬体的数量(P0.05或P0.01);125、500μg/mL人参根提取物均可显著提高细胞存活率,显著提高细胞中IL-4、IL-6和TNF-α的水平,显著促进细胞中LC3BⅠ向LC3BⅡ转化,显著上调细胞中Beclin-1蛋白表达水平,显著提高AMPK蛋白的磷酸化水平,显著降低AKT和mTOR蛋白的磷酸化水平,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:人参根提取物能通过激活AMPK、抑制AKT活化来抑制mTOR活性,从而诱导小鼠脾淋巴细胞发生自噬、激活脾淋巴细胞活性、调节细胞因子分泌以发挥免疫增强作用。