犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

作     者：隋君霞 隋京京 李晓 姜忠玲 曹荣峰 丰艳妮 李华涛 SUI Jun-xia;SUI Jing-jing;LI Xiao;JIANG Zhong-ling;CAO Rong-feng;FENG Yan-ni;LI Hua-tao

作者机构：青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第56卷第6期

页      面：72-76页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：山东省重点研发计划(2018GNC110005) 山东省自然科学基金(ZR2019MC027) 青岛农业大学研究生创新立项(QYC201814) 大学生创新创业训练计划项目。 

主　　题：犬DEA1.1 红细胞膜 间接ELISA 间接抗球蛋白试验 

摘      要：为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.0625%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4~8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。