泡盛曲霉抗FOA突变株的筛选与转化

作     者：苟兴华 张义正 Gou Xinghua;Zhang Yizheng

作者机构：四川大学生命科学学院成都610064 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2000年第40卷第2期

页      面：161-165页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金!资助项目 ( 394 30 0 2 0 ) 

主　　题：泡盛曲霉 URA3基因 基因突变 外源基因表达载体 

摘      要：根据泡盛曲霉SG1菌株分生孢子的紫外线致死曲线,选择死亡率为85%～90%的诱变时间诱变分生孢子,然后将其涂布于含FOA(5-flourooroticacid)和尿嘧啶核苷的基本培养基上,选择抗FOA的突变株。经过纯化和回复突变检测后,获得了5株需要尿嘧啶或尿嘧啶核苷才能在基本培养基上生长的稳定突变株。进一步分析鉴定结果表明,这些突变株的URA3基因发生了突变。Northern杂交及RTPCR方法证明这些突变株中URA3基因突变均发生在转录水平上。选择突变株SA5作为受体菌,用含来自黑曲霉的野生型URA3基因的质粒转化该受体菌,结果获得了稳定的转化子。Southern杂交证明野生型URA3基因取代了突变株的ura3基因。