人AP2β基因慢病毒表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞生长的影响

作     者：霍楠 马路园 朱祥 丛瑞 初众 唐枝 亢小峰 赵彩彦 徐小洁 HUO Nan;MA Lu-yuan;ZHU Xiang;CONG Rui;CHU Zhong;TANG Zhi;KANG Xiao-feng;ZHAO Cai-yan;XU Xiao-jie

作者机构：军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100850 河北医科大学第三医院感染科石家庄071000 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2020年第44卷第2期

页      面：105-109页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金优秀青年基金项目(81822037) 国家自然科学基金面上项目(81672602,81972446) 全军后勤科研计划重点项目(BWS16J010) 

主　　题：AP2β基因 慢病毒属 载体 肝肿瘤 HepG2细胞 

摘      要：目的构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成Lenti-AP2β慢病毒并测定病毒滴度,感染肝癌HepG2细胞,Western印迹检测病毒载体介导的AP2β蛋白的表达情况,并进行生长曲线实验研究过量表达AP2β对HepG2细胞生长的影响。结果双酶切和Western印迹表明,pCDH-AP2β真核表达质粒构建成功,包装成滴度为2.5×107PFU/ml的LentiAP2β慢病毒载体;将此慢病毒载体感染HepG2细胞,Western印迹显示,慢病毒载体成功表达AP2β,生长曲线和克隆形成实验结果表明,AP2β过表达可抑制肝癌细胞HepG2的生长。结论构建了AP2β的慢病毒表达载体LentiAP2β,在HepG2细胞中过量表达AP2β可抑制细胞的生长,该实验为进一步研究AP2β在肝癌中的功能奠定了基础。