水稻抽穗期基因OsDof6功能的初步研究

作     者：张立成 李懿星 王天抗 邱牡丹 宋书锋 董皓 李磊 刘建丰 李莉 ZHANG Licheng;LI Yixing;WANG Tiankang;QIU Mudan;SONG Shufeng;DONG Hao;LI Lei;LIU Jianfeng;LI Li

作者机构：湖南农业大学农学院长沙410128 杂交水稻国家重点实验室湖南杂交水稻研究中心长沙410125 湖南大学研究生院隆平分院长沙410125 

出 版 物：《中国水稻科学》 (Chinese Journal of Rice Science)

年 卷 期：2020年第34卷第5期

页      面：397-405页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31671669) 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0101103) 国家自然科学基金资助项目(31901530) 

主　　题：水稻 Dof家族 抽穗期 CRISPR/Cas9 

摘      要：【目的】以前期通过穗发育芯片筛选到一个水稻Dof家族转录因子OsDof6为研究对象,进一步探究OsDof6的表达模式与生物学功能。【方法】对OsDof6的基因、蛋白及启动子序列进行生物信息学分析,利用CRISPR/Cas9技术对该基因进行定点编辑,通过实时定量PCR和亚细胞定位技术分析该基因的表达模式。【结果】对该基因的启动子序列分析表明,该基因启动子中存在大量与光响应、激素响应及胁迫响应相关的顺式调控元件。利用CRISPR/Cas9技术获得了2种不同突变类型的功能缺失突变体9522Dof6-3和9522Dof6-4。对突变体T1株系进行表型观察发现,相较于对照,两种突变体在营养生长阶段分蘖数明显降低,转入生殖生长阶段后,两种突变体的抽穗时间推迟约3 d。实时定量PCR结果显示OsDof6在水稻根、茎、叶和穗中均有不同程度的表达,在穗发育后期相对表达量明显提高;通过亚细胞定位分析发现OsDof6定位于细胞核。【结论】初步判断OsDof6基因会影响水稻分蘖数与抽穗期。