人-鼠杂交瘤制备人单克隆抗体技术的研究

作     者：叶银英 刘立华 姜凯 葛曼丽 李明举 

作者机构：南京铁道医学院科研所南京210009 

出 版 物：《单克隆抗体通讯》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：1991年第7卷第4期

页      面：54-59页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：江苏省卫生厅资助课题(H8722) 

主　　题：人-鼠 杂交瘤 单克隆抗体 

摘      要：本文采用小鼠骨髓瘤细胞系(Sp2/0)与破伤风类毒素(TT)免疫的人外周血淋巴细胞(PBL)进行融合,对人—鼠杂交瘤细胞系制备人单克隆抗体的技术条件进行了探讨。按免疫时间(d)及体外刺激与否分为4组。结果表明:(1)PWM+TT体外刺激可导致B细胞总数增加,且融合率高,容易建成稳定分泌人单抗的细胞株。(2)经TT免疫的人PBL,6d就有抗TT抗体(IgG)的前体细胞出现。15d及21d时,抗TT抗体前体细胞的频率更高。(3)体内免疫7d及14d并分别经体外刺激的两组共建立5株阳性株。经双扩碓定IgG2株,IgM3株。冻存10个月后复苏、传代及适当的克隆化后仍为阳性。上清液中人Ig的分泌量为0.42～1.15μg/ml。经染色体核型鉴定,碓认为人-鼠杂种细胞。