黄芩含药血清对神经干细胞分化钠离子通道基因及cAMP/PKA信号通路的影响

作     者：赵凡 尚志远 瞿融 ZHAO Fan;SHANG Zhiyuan;QU Rong

作者机构：南京中医药大学江苏省南京市210046 

出 版 物：《中医杂志》 (Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2020年第61卷第16期

页      面：1444-1448页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81573701) 江苏省研究生培养创新工程研究生科研与实践创新计划(KYCX19_1282) 

主　　题：黄芩 神经干细胞 细胞分化 钠离子通道 cAMP/PKA通路 

摘      要：目的研究黄芩含药血清对神经干细胞分化的影响及可能机制。方法分离培养原代乳大鼠神经干细胞,利用免疫荧光法进行鉴定。SD大鼠分别给予500和1000mg/kg黄芩水煎剂每日灌胃1次,连续7天后制备黄芩高、低剂量含药血清。黄芩低、高含药血清均设0.1%、1%、10%三个浓度干预神经干细胞,进行试验药物浓度筛选。收集神经干细胞以每孔1×10^5个接种于24孔板中,实验分为对照组、黄芩含药血清组和含药血清加抑制剂组,每组3个复孔。对照组每孔加入10μl空白大鼠血清,黄芩含药血清组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清,含药血清加抑制剂组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清及1μl浓度为10mmol/L的H89溶液,隔天换液,共分化7天。比较各组细胞中双肾上腺皮质激素(DCX)、神经元核心抗原(NeuN)细胞增长率;检测细胞中钠离子通道亚型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达,蛋白激酶A(PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)蛋白表达,细胞上清中腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)浓度。结果筛选出1%黄芩高剂量含药血清用于后续实验。与对照组比较,黄芩含药血清组细胞中DCX、NeuN细胞增长率增加,SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达增加,p-PKA/PKA值及AC、cAMP浓度增加(P0.05或P0.01);与黄芩含药血清组比较,含药血清加抑制剂组上述各指标均不同程度降低(P0.01)。结论黄芩含药血清可促进海马神经干细胞分化,其机制可能与促进钠离子通道基因、cAMP/PKA通路酶及蛋白的表达有关。