双氢青蒿素脂质体的制备及抑制耐药结核分枝杆菌机制的考察

作     者：古秀娟 曾娅莉 邓建军 乔刚 GU Xiujuan;ZENG Yali;DENG Jianjun;QIAO Gang

作者机构：西南医科大学医学检验系四川泸洲646000 四川绵阳四〇四医院临床检验科四川绵阳621000 绵阳市疾病预防控制中心四川绵阳621000 西南科技大学四川绵阳621010 

出 版 物：《中国医药工业杂志》 (Chinese Journal of Pharmaceuticals)

年 卷 期：2020年第51卷第7期

页      面：882-888页

学科分类：100702[医学-药剂学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(41472046) 四川省科技厅重点项目(2019YFS0090) 绵阳市科技局项目(150170) 

主　　题：双氢青蒿素 纳米药物 耐药结核分枝杆菌 耐药基因 抑菌率 

摘      要：采用乙醇注入法制备载双氢青蒿素(DHA)的脂质体,并进行表征。结果显示,制备的载药脂质体呈类球形,平均粒径为(429.0±12.1)nm,包封率为(80.0±3.6)%,载药量为(8.6±0.3)%。然后,采用碘化丙啶(PI)/SYTO9(绿色荧光核酸染料)双染色法-流式细胞技术检测制品对耐药结核分枝杆菌(DR-MTB)的抑菌效果,并筛选出最佳抑菌浓度。结果显示,与DHA原料药相比,载药脂质体在低浓度时对DR-MTB具有更好的抑菌作用,在4μg/ml时抑菌率最高,达到(40.3±1.1)%。测得DHA原料药及其脂质体的最小抑菌浓度为32和0.5μg/ml。采用荧光染色、抗酸染色、革兰染色和实时荧光定量PCR技术检测载药脂质体对DR-MTB形态学和耐利福平(RIF)基因的影响。与阴性对照组相比,抗酸染色、荧光染色结果显示载药脂质体处理组DR-MTB数量显著减少,菌体链状结构消失,呈短小杆状,革兰染色结果显示该组DR-MTB染色由难变易。实时荧光定量PCR结果显示载药脂质体没有逆转DR-MTB的RIF耐药基因,提示其抑菌机制可能与破坏DR-MTB细胞壁结构相关。