先天性小耳畸形残耳软骨细胞的体外生物学行为的实验研究

作     者：蔡震 潘博 林琳 蒋海越 庄洪兴 

作者机构：四川省医学科学院四川省人民医院整形外科四川成都610072 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院整形七科 

出 版 物：《中国美容整形外科杂志》 (Chinese Journal of Aesthetic and Plastic Surgery)

年 卷 期：2010年第21卷第9期

页      面：553-556页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

主　　题：残耳软骨细胞 Ⅱ型胶原 蛋白多糖 种子细胞 软骨组织工程 

摘      要：目的探讨先天性小耳畸形残耳软骨细胞体外生长的生物学特性。方法取先天性小耳畸形患者外耳再造手术中废弃的残耳软骨组织，采用胶原酶消化法获得残耳软骨细胞；体外传代培养及生物学特性研究：细胞形态学观察，细胞生长曲线测定，Ⅱ型胶原免疫组化鉴定残耳软骨细胞，RT—PCR检测第1～5代残耳软骨细胞的Ⅱ型胶原及蛋白多糖的mRNA表达。结果原代和第1-3代残耳软骨细胞生长旺盛，呈多角形，第3代以后细胞体积变大，呈长梭形转化，细胞增殖逐渐减弱；免疫组化检测第2代残耳软骨细胞Ⅱ型胶原表达呈阳性；RT—PCR显示mRNA水平第1～3代软骨细胞Ⅱ型胶原高表达，随传代次数增加表达逐渐减弱，第5代基本消失；第1～3代细胞蛋自多糖呈高表达，第4代以后随传代表达逐渐减弱。结论体外成功分离培养出残耳软骨细胞，第1—3代细胞形态保持稳定．Ⅱ型胶原和蛋白聚糖稳定旱高表达。