石豆兰无菌材料的建立及离体培养初探

作     者：黄崇成 苗永美 方达 王宇豪 童元 HUANG Chongcheng;MIAO Yongmei;FANG Da;WANG Yuhao;TONG Yuan

作者机构：安徽科技学院生命与健康科学学院安徽凤阳233100 

出 版 物：《安徽科技学院学报》 (Journal of Anhui Science and Technology University)

年 卷 期：2019年第33卷第6期

页      面：50-54页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：安徽科技学院稳定人才项目(SKWD201701) 国家级大学生创新训练项目(201710879035)。 

主　　题：石豆兰 无菌材料 超声处理 抗菌素 激素配比 

摘      要：目的:获取大量石豆兰无菌材料为后期细胞工程和基因工程等相关研究奠定基础。方法:选用假鳞茎和嫩芽为外植体,采用0.1%HgCl 2结合超声表面消毒,培养基中添加抗菌素抑制内生菌,继代时逐步降低抗菌素浓度最终获得无菌材料;初步研究激素配比对鳞芽增殖的影响。结果:HgCl 2结合超声处理能降低外部菌的污染率,提高成活率,10 min时效果最好。75 mg/L制菌霉素和50 mg/L萘啶酮酸抑制内生菌效果最好,90 d统计污染率为20%,无菌材料成活率为60%。6-BA和NAA对于芽分化影响显著,增殖倍数随6-BA浓度升高先增大后降低,2水平即浓度0.4 mg/L时显著高于其它两个水平;随着NAA浓度升高,增殖倍数逐步增大,3水平即浓度为0.2 mg/L时最大且显著高于其它两个水平。鳞芽在最佳激素配比6-BA 0.60 mg/L和NAA 0.2 mg/L条件下经过60 d培养,增殖了2.90倍。结论:通过化学和物理方法并结合抗菌素处理有效抑制了石豆兰内外菌物,优化了增殖的激素配比,获得了大量生长良好的无菌材料。