新型镇静催眠化合物YZG-331对谷氨酸及其受体的调节及机制研究

作     者：方金玉 刘伟 于凤婷 石建功 张建军 FANG Jin-yu;LIU Wei;YU Feng-ting;SHI Jian-gong;ZHANG Jian-jun

作者机构：中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所新药作用机制研究和药效评价北京市重点实验室北京100050 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2020年第55卷第5期

页      面：877-883页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81773715,81630094) 国家科技重大新药创制专项(2018ZX09711001-001-012) 

主　　题：YZG-331 谷氨酸 N-甲基-D-天冬氨酸受体 前额叶皮层 微透析 镇静催眠 

摘      要：本研究主要探究了新型腺苷类衍生物YZG-331对小鼠额叶皮层谷氨酸(glutamate, Glu)含量及对其受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor, NMDAR)的影响。动物实验均获得中国医学科学院药物研究所伦理委员会批准。采用脑微透析取样技术和高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)检测小鼠额叶皮层组织匀浆和细胞外液中的Glu含量;Western blot和蛋白质免疫共沉淀技术检测小鼠额叶皮层中NMDAR在细胞膜上和内体中的表达量,以及引起NMDAR内吞相关蛋白的表达量及相互作用。研究结果显示,在灌胃给予YZG-331 (40 mg·kg^-1)后小鼠额叶皮层组织匀浆中Glu含量与溶剂对照组相比无统计学差异,在0~0.5 h和0.5~1 h两个时间段的小鼠额叶皮层透析液中Glu含量也无明显变化。给予YZG-331 15 min后小鼠额叶皮层细胞膜上NMDAR亚基NR1与NR2B的表达量均下调,额叶皮层细胞内体的NR1和NR2B蛋白表达量显著增加,额叶皮层组织中NMDAR亚基NR2B磷酸化水平显著上升;同时用NR2B作为诱饵蛋白的免疫共沉淀结果显示小鼠额叶皮层组织的NR2B和突触后致密蛋白95 (postsynaptic density-95, PSD95)免疫沉淀复合物中PSD95表达量显著降低。以上研究结果表明,化合物YZG-331对额叶皮层组织和细胞外液中Glu含量均无影响,但通过上调额叶皮层组织NR2B的磷酸化水平,减弱了NR2B与突触后致密蛋白PSD95的相互作用,降低了NMDAR的膜稳定性,促进了NMDAR的内吞,导致兴奋信号传导减少。这可能是其发挥其镇静催眠作用的机制之一。