TaqMan探针实时荧光PCR方法检测粪便中微小隐孢子虫卵囊
Detection of Cryptosporidium parvum in Human Stool Using TaqMan Real-time Polymerase Chain Reaction作者机构:张家港出入境检验检疫局张家港215600 苏州大学医学部公共卫生学院苏州215123
出 版 物:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)
年 卷 期:2012年第30卷第4期
页 面:333-334,F0003页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金:江苏出入境检验检疫局科研项目(No.2010KJ17)~~
主 题:微小隐孢子虫 TaqMan探针 实时荧光PCR 检测
摘 要:以微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)特异性DnaJ-like蛋白基因的保守序列为模板,设计和合成特异性引物和荧光标记探针,通过检测微小隐孢子虫卵囊DNA和加标模拟样品进行敏感性分析,建立标准曲线,并对其特异性和干扰性进行评价。结果显示,该方法只对微小隐孢子虫卵囊进行特异性扩增,其他常见的肠道原虫和肠道病原菌均不能扩增;微小隐孢子虫纯卵囊基因组DNA检测的灵敏度为26个/ml;对加标粪样可检测至2 600个/ml卵囊。提示本研究建立的实时荧光PCR检测微小隐孢子虫卵囊方法具有快速、特异性和敏感性高等优点。