hGITR_(aa1-165)-IgG1Fc真核表达质粒的构建及其表达

作     者：崔大伟 王胜军 陈君 仝佳 陈建国 王海生 杨先知 史烨 许化溪 邵启祥 CUI Da-wei;WANG Sheng-jun;CHEN Jun;TONG Jia;CHEN Jian-guo;WANG Hai-sheng;YANG Xian-zhi;SHI Ye;XU Hua-xi;SHAO Qi-xiang

作者机构：江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学系江苏镇江212013 江苏大学附属人民医院检验科江苏镇江212002 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2009年第19卷第1期

页      面：31-34,38,F0002页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30300169) 江苏省卫生厅面上项目(H200859) 江苏大学高级人才基金资助项目(05JDG042) 江苏大学拔尖人才培养工程资助项目 

主　　题：糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体 COS-7细胞 真核表达 

摘      要：目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IgG1Fc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒。将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达。结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础。