信号肽对O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中表达及分泌的影响
Effect of signal peptide on expression and secretion of type O FMDV recombinant epitope protein in CHO作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046
出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)
年 卷 期:2020年第50卷第3期
页 面:276-282页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家重点研发计划项目(2017YFD0500902 2016YFE0204100)。
摘 要:构建融合不同信号肽的O型口蹄疫病毒重组表位蛋白真核表达载体,筛选不同的分泌型信号肽以提高O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)中的表达并使其分泌到CHO培养基中。通过PCR方法将10种不同的分泌型信号肽与串联表位基因的5′端相连,分别构建了真核表达载体并转染哺乳动物细胞CHO,采用Western-blot检测CHO培养基中重组表位蛋白累积量,研究结果表明,O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中成功分泌表达,不同的分泌型信号肽明显改变O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO培养基中的累积SCGB1D1 isoform信号肽介导的O型口蹄疫病毒重组表位蛋白表达量最高。综上所述,合适的分泌型信号肽促进O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中的分泌。