农杆菌介导转化木霉原生质体的研究

作     者：顾斌涛 熊大维 Gu Bin-tao;Xiong Da-wei

作者机构：江西省科学院微生物研究所江西南昌330096 

出 版 物：《生物化工》 (Biological Chemical Engineering)

年 卷 期：2020年第6卷第2期

页      面：10-13页

学科分类：08[工学] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：江西省重点研发计划项目(20181BBF60023) 

主　　题：原生质体 根癌农杆菌 里氏木霉 遗传转化 

摘      要：目的:利用里氏木霉原生质体作为受体材料研究根癌农杆菌介导转化的条件。方法:以潮霉素抗性基因为筛选条件,里氏木霉原生质体为转化受体,分别对不同的根癌农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、共培养时间、共培养温度和共培养基pH进行根癌农杆菌介导转化里氏木霉,研究上述条件下根癌农杆菌介导转化里氏木霉的转化效率。结果:在根癌农杆菌菌液OD660为0.8、乙酰丁香酮浓度为80μg/mL、共培养时间为48 h、共培养温度为24℃、共培养基pH为5.4时,根癌农杆菌介导转化里氏木霉原生质体的效率最高,在此条件下,根癌农杆菌介导转化的效率为87个转化子/106个细胞,是传统以分生孢子为受体材料的1.9倍。结论:建立了根癌农杆菌介导转化里氏木霉原生质体的方法,获得了适宜的转化条件,有利于对里氏木霉遗传改造时获得大量的转化子。