HIF1α-shRNA表达载体的构建与鉴定

作     者：李正堃 李慧瑾 

作者机构：西安医学院医学技术学院西安710021 陕西省缺血性心血管疾病重点实验室<西安医学院基础与转化医学研究所>西安710021 

出 版 物：《科技视界》 (Science & Technology Vision)

年 卷 期：2020年第7期

页      面：159-161页

学科分类：07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 090102[农学-作物遗传育种] 0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(81502249) 西安医学院配套基金项目(2016PT32) 陕西省教育厅2018年度重点科学研究计划项目(18JS103) 西安医学院配套基金项目(2018PT26) 

主　　题：HIF1α shRNA 载体构建 

摘      要：目的:构建HIF1α-shRNA表达载体并鉴定,为进一步研究其在肿瘤发生发展中的作用奠定基础。方法:设计合成两条互补的编码HIF1α-shRNA的DNA寡核苷酸单链,退火形成互补双链,后将退火产物与酶切线性化的表达载体pG1.1连接后,转化至感受态细胞DH5α中,提取重组质粒并酶切鉴定,挑取克隆正确的重组质粒去测序鉴定插入序列。结果:重组质粒酶切结果显示退火片段连接到pG1.1载体里,经测序分析重组质粒插入序列与合成的寡核苷酸序列一致。结论:HIF1α-shRNA表达载体构建成功,为后续研究提供基础。