团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析

作     者：王济秀 张锋 王卫民 刘红 WANG Jixiu;ZHANG Feng;WANG Weimin;LIU Hong

作者机构：华中农业大学水产学院农业农村部淡水生物繁育重点实验室 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2020年第44卷第4期

页      面：528-538页

核心收录：

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31572613) 湖北省协同创新中心建设专项资金(2016ZXPY04)~~ 

主　　题：团头鲂 tf基因 tfr1a基因 启动子 转录调控 

摘      要：为探索鱼类转铁蛋白基因tf和转铁蛋白受体基因tfr1a的转录调控机制,本实验以团头鲂为研究对象,在其全基因组数据库中获取tf和tfr1a基因序列,对2个基因候选启动子区转录因子结合位点及CpG岛进行预测,通过PCR方法克隆得到tf和tfr1a基因近端启动子区不同长度片段,连接至pGL3-Basic/pEGFP-1载体,瞬时转染入Hela细胞,并采用双荧光素酶报告基因检测系统进行检测。结果发现,团头鲂tf基因启动子区无CpG岛位点,而tfr1a基因启动子区有2个CpG岛位点。成功构建9个tf和10个tfr1a不同长度启动子片段的重组质粒,经双荧光素酶报告基因系统检测发现,tf启动子核心区域为-268～+56 bp,且-1 308～-1 102 bp片段可能存在正调控该基因表达的转录因子结合位点;tfr1a启动子核心区域为-224～+48 bp,且+48～+92 bp可能存在抑制该基因转录的负调控元件,而-1 229～-1 219 bp区域可能存在促进tfr1a基因表达的正调控转录因子结合位点。