三维培养下胰岛素样生长因子Ⅰ对人牙周膜细胞增殖及早期成骨向分化的影响
Effect of insulin-like growth factor on the proliferation and early stage osteogenesis of human periodontal ligament stem cells under three-dimensional culture system作者机构：解放军总医院军医进修学院08博士队北京100853 解放军306医院全军口腔疾病诊治中心 解放军306医院病理实验科
出 版 物：《中华口腔医学杂志》 (Chinese Journal of Stomatology)
年 卷 期：2011年第46卷第3期
页 面：143-147页
核心收录：
学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学]
主 题：胰岛素样生长因子Ⅰ 细胞增殖 人牙周膜细胞 成骨向分化
摘 要：目的 了解胰岛素样生长因子Ⅰ（insudin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ）在三维培养环境中对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,hPDLC）生长、分化的影响,以期为进一步研究牙周组织的再生提供实验依据.方法 从手术拔除的8颗前磨牙或第三磨牙中获取牙周膜组织,利用有限稀释法培养获得hPDLC.采用旋转细胞培养系统（rotary cell culture system,RCCS）建立三维培养环境,根据培养液中加入IGF-Ⅰ的不同质量浓度分为对照组（0 μg/L）和5个实验组（0.1、1、10、50及100μg/L）,甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞增殖情况.成骨诱导培养中加入上述不同质量浓度的IGF-Ⅰ,分光光度计法检测碱性磷酸酶（alkine phosphatase,ALP）浓度,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测骨钙素及Ⅰ型胶原基因表达水平.结果 三维培养下,各实验组IGF-Ⅰ对细胞增殖的作用均显著高于对照组（P0.05）,其中IGF-Ⅰ 0.1μg/L组细胞增殖活性（0.219±0.021）与50μg/L组（0.287±0.011）、100 μg/L组（0.293±0.012）相比差异均有统计学意义（P0.05）,其余组间差异均无统计学意义（P0.05）.各实验组ALP活性均显著高于对照组（P0.05）,1μg/L组（0.304±0.020）与10 μg/L组（0.310±0.013）相比差异无统计学意义,50 μg/L组（0.347±0.011）与100μg/L组（0.344±0.010）相比差异无统计学意义,但50、100 μg/L组显著高于1、10μg/L组,且四组均显著高于0.1 μg/L组（0.212±0.011）,P0.05.Ⅰ型胶原及骨钙素的产物表达在mRNA水平及蛋白水平均呈现随浓度升高而升高的趋势.结论 在本实验三维培养条件下,IGF-Ⅰ对hPDLC的促增殖作用在0.1～100μg/L范围内呈浓度依赖性增强;100 μg/L IGF-Ⅰ在三维培养条件下具有明确的促hPDLC成骨向分化的作用.
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